基本信息：

細胞概述

- 定義：小鼠原代腎足突細胞是從小鼠組織中分離得到的，未經傳代培養或僅經過少數幾次傳代的細胞，保持了細胞在體內的原始特性。
- 來源：主要來自小鼠的腎組織，通常選取2-3月齡、體重18-22g的BALB/c小鼠等合適品系的小鼠作為細胞供體。
- 重要性：足細胞連同腎小球基底膜和皮一起構成了腎小球血液濾過屏障，對于維持機體正常的功能和內環境穩定至關重要。

細胞特性

- 形態特征：呈星型多突狀，胞體較大，由胞體伸出許多突起，又稱足突，呈指狀交叉覆蓋于腎小球基底膜外表面。
- 生長特性：屬于貼壁生長的細胞，需要附著在合適的基質表面才能生長和增殖。
- 功能特性：正常情況下可分泌腎小球基底膜的主要組成成分，如IV型膠原和纖維連接蛋白；在促腎纖維化等刺激下，能分泌具有降解腎小球基底膜作用的基質金屬蛋白酶和組織蛋白酶，參與腎小球基底膜的代謝平衡。

分離與培養

- 分離方法：常用機械研磨過不同孔徑不銹鋼網篩結合膠原酶消化法，或單純酶解法。先將小鼠處死，取出，剪取腎皮質部，經研磨、過濾、消化等步驟，獲得腎小球，再進一步處理得到腎足突細胞。
- 培養條件：一般使用F-12等培養基，添加5%馬血清、2.5%胎牛血清、胰島素、氫化可的松、轉鐵蛋白等成分，在37℃、5%CO?的培養箱中培養。

鑒定方法

- 形態學觀察：通過光學顯微鏡或電子顯微鏡觀察細胞的形態特征，如星型多突狀、足突的指狀交叉等。
- 免疫學鑒定：采用免疫熒光或免疫組化方法，檢測細胞特異性標記物，如Podocin、WT-1等，若呈陽性則表明為腎足突細胞。

產品名稱 小鼠腎足突細胞
組織來源 腎組織
產品規格 5×10^5Cells/T25
方法簡介 公司實驗室分離的小鼠腎足突采用機械研磨過不同孔徑不銹鋼網篩結合膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測 公司實驗室分離的小鼠腎足突經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

注意事項：

該細胞只可用于科研。出現以下情況不予以重發：客戶造成細胞污染；客戶不正確操作致細胞狀態不好；細胞狀態不好，未提供細胞培養前3天照片；細胞培養時經其它處理；細胞收到2天內，未告知相關情況。
公司出售的產品：

傳代步驟：
棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1 - 2次。
加2ml消化液（0.25% Trypsin - 0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1 - 2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
按6 - 8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1 - 2mL培養液后吹勻。
將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
復蘇步驟：
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1 - 2mL培養基后吹勻。換液并檢查細胞密度。
凍存步驟：
以T25瓶為例：
細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1 - 2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
1000RPM離心5分鐘去掉上清，用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。
將凍存管置于程序降溫盒中，放入 - 80℃冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存，記錄凍存管位置以便下次拿取。