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    上海帛科生物技術有限公司
       
       
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    Stbl2 感受態細胞
    起訂量 (瓶)價格
    1-102350 /瓶
    ≥101250 /瓶
    • 品牌:帛科
    • 產地:進口、國產
    • 貨號:BK-G63231
    • 發布日期: 2021-02-21
    • 更新日期: 2025-12-05
    產品詳請
    產地 進口、國產
    保存條件 低溫冷藏
    品牌 帛科
    貨號 BK-G63231
    用途 產品僅用于科研
    組織來源 詳見說明書
    細胞形態 詳見說明書
    是否是腫瘤細胞
    CAS編號
    保質期 詳見說明書
    器官來源 詳見說明書
    免疫類型 詳見說明書
    品系 詳見說明書
    生長狀態 詳見說明書
    物種來源 詳見說明書
    包裝規格 100ul*10 100ul*50
    純度 %
    是否進口
    規格參數:

    產品名稱:Stbl2 感受態細胞
    規格 :100ul*10 100ul*50
    分類:克隆感受態細胞
    用途:生化試劑(用于科研試驗研究)
    儲存條件: -70℃保存,必須加干冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年,-70℃保存至少6個月。
    外觀:(性狀) 干冰運輸,單加10kg干冰費
    單位: 袋

    細胞培養操作規程:

    一.培養基及培養凍存條件準備:
    1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
    2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
    3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
    二.細胞處理:
    1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
    2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
    對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
    方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
    注意事項:
    1. 感受態細胞*在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉化效率。
    2. 混入質?;蜻B接產物時應輕柔操作。
    3. 轉化高濃度的質?;蚋咝实倪B接產物可相應減少最終用于涂板的菌量。
    同一批感受態細胞,用含目的片段的T載體質粒轉化(陽性對照)能長出密密麻麻的菌落,而用另一種載體和目的片段的連接產物轉化,卻一個菌都沒長出來,重復了三次都這樣。請問這是感受態細胞的制作不過關,還是連接出了問題?哪個可能性大些?
    答:應該是連接的問題。所有連接反應建議同時轉化酶切后的質粒作為另一個陰性對照,確定酶切是否完全。同時連接前請確定質粒和片段濃度達到最小連接量的要求。
    感受態細胞放到-80冰箱了有半年了,還能用來轉化質粒嗎?
    答:如-80冰箱儲存過程中沒有發生凍融的情況,是可以用來轉化的,但是由于凍存時間過長,轉化效率會有所下降,如果用于普通的質粒重轉或TA克隆等高效連接體系也是可以的,如珍貴的樣品請選用較為新鮮的感受態細胞。
    操作方法:
    1. DH5α感受態細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質?;蜻B接產物)并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
    2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
    3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。
    4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。

    5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養至少15小時。

    棕櫚酸甲酯(分析標準品,≥99.0%(GC))質量規格:分析標準品,≥99.0%(GC)Methyl palmitate  HumanAtaxiatelangiectasiamated,ATMELISA試劑盒人擴張性突變基因(ATM)ELISA試劑盒規格:96T/48T  綿羊白介素6(IL-6)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

    亞麻酸甲酯(標準品)質量規格:分析標準品Methyl linolenate  植物源性食品小麥(wheat)試劑盒20  人脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)試劑盒 Human Adipose iglyceride Lipase,ATGL ELISA kit

    十一酸甲酯(標準品)質量規格:分析標準品Methyl undecanoate  Humahrombusprecursorprotein,TpPELISAKit人前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒規格:96T/48T  細胞功能相關抗原2(LFA-2/CD2)ELISA試劑盒 ,英文名: LFA-2/CD2 ELISA Kit

    分子篩, 5 ?(pellets, 2.5-3.5 mm)質量規格:pellets, 2.5-3.5 mmMolecular sieves, 5 ?  小鼠蛋酸酶3調節因子亞基1(PPP3R1)ELISA試劑盒 ,英文名: PPP3R1 ELISA Kit  Ratcarnitine-acylcarnitineanslocase,CACTELISA試劑盒大鼠肉毒堿脂酰轉移酶(CACT)ELISA試劑盒規格:96T/48T

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    綿羊白介素1(IL-1)ELISA檢測試劑盒SheepIerleukin1,IL-1ELISAKit 96T/48T  473-08-*-香附酮  α-Cyperone

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    英文名稱MouseApelin-12ELISAKIT小鼠Apelin-12規格:96T/48T  10284-63-6D-松醇品牌  D-Pinitol

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    961-29-5異甘草素規格  Isoliquiritigenin   組織基質金屬蛋白酶(MMP-7)活性比色法定量檢測試劑盒20

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