規格參數：
產品名稱：DH5α 感受態細胞
規格 ：100ul*20、100ul*100
分類：克隆感受態細胞
用途：生化試劑（用于科研試驗研究）
儲存條件: -70℃保存，必須加干冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年，-70℃保存至少6個月。
外觀:（性狀） 干冰運輸，單加10kg干冰費
單位: 袋
細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
注意事項：
1. 感受態細胞*在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質?；蜻B接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質?；蚋咝实倪B接產物可相應減少最終用于涂板的菌量。
同一批感受態細胞，用含目的片段的T載體質粒轉化（陽性對照）能長出密密麻麻的菌落，而用另一種載體和目的片段的連接產物轉化，卻一個菌都沒長出來，重復了三次都這樣。請問這是感受態細胞的制作不過關，還是連接出了問題？哪個可能性大些？
答：應該是連接的問題。所有連接反應建議同時轉化酶切后的質粒作為另一個陰性對照，確定酶切是否完全。同時連接前請確定質粒和片段濃度達到最小連接量的要求。
感受態細胞放到-80冰箱了有半年了，還能用來轉化質粒嗎？
答：如-80冰箱儲存過程中沒有發生凍融的情況，是可以用來轉化的，但是由于凍存時間過長，轉化效率會有所下降，如果用于普通的質粒重轉或TA克隆等高效連接體系也是可以的，如珍貴的樣品請選用較為新鮮的感受態細胞。
操作方法：
1. DH5α感受態細胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質?；蜻B接產物）并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。
5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養至少15小時。
甲胎蛋白單克隆抗體（包被） AFP(A2) 0.1ml
甲胎蛋白單克隆抗體(檢測) AFP(A4) 0.1ml
ADP核糖基化因子結合蛋白1抗體 ARFIP1 0.1ml
芳香烴受體抗體 AHR 0.1ml
吸引素抗體 ATRN 0.2ml
腺苷三磷酸結合盒轉運體A1抗體 ABCA1 0.1ml
蛋白激酶B2 AKT2 0.1ml
生成素2抗體 Angiopoietin 2 0.1ml
芳香化酶/細胞色素P450/雌激素合成酶抗體 Aromatase 0.1ml
腺苷A2A受體抗體 Adenosine Receptor A2a 0.1ml
蛋白激酶A錨定蛋白95抗體 AKAP95 0.1ml
頂膜鈉依賴性膽鹽轉運體蛋白抗體 ASBT 0.1ml
去整合素樣金屬蛋白酶8抗體 ADAM8 0.2ml
芳香乙酰胺脫乙酰基酶樣蛋白3抗體 AADACL3 0.2ml
ACN9蛋白抗體 ACN9 0.2ml
雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體（N端） ADAR1 (N-terminus) 0.2ml
腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體 AMPK alpha 2 0.1ml
腺苷酸激酶抗體 ADK 0.1ml
α2巨球蛋白樣蛋白1抗體 α2ML1 A2ML1 0.1ml
細胞凋亡相關蛋白3抗體 3-Apr 0.1ml
肌動蛋白α/α-SMA/α Actin抗體 Actin 0.1ml
ATP結合蛋白家族7抗體 ABCB7 0.2ml
ASCL2蛋白抗體 ASCL2 0.2ml
磷酸化脊髓蛋白1抗體 phospho-Ataxin 1(Ser775) 0.1ml
磷酸化活化轉錄因子1抗體 phospho-ATF1 (Ser63) 0.1ml
磷酸化活化復制因子2抗體 phospho-ATF2 (Ser480) 0.1ml
磷酸化活化復制因子2抗體 phospho-ATF2 (Thr51 + Thr53) 0.1ml
磷酸化活化復制因子2抗體 phospho-ATF2 (Thr69 + Thr51) 0.1ml
轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒 特價促銷 ，英文名： TGF-β1 ELISA Kit
轉化生長因子α(TGF-α)ELISA試劑盒 進口分裝 ，英文名： TGF-α ELISA Kit
轉谷氨酰胺酶2C多肽(TGM2)ELISA試劑盒 進口原裝 ，英文名： TGM2 ELISA Kit
主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)ELISA試劑盒 特價供應 ，英文名： MHCⅢ/HLA-Ⅲ ELISA Kit
主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA試劑盒 特價促銷 ，英文名： MHCⅡ/HLA-Ⅱ ELISA Kit
主要組織相容性復合體Ⅰ類(MHCⅠ/HLAⅠ)ELISA試劑盒 進口分裝 ，英文名： MHCⅠ/HLAⅠ ELISA Kit
主要穹窿蛋白(MVP)ELISA試劑盒 進口原裝 ，英文名： MVP ELISA Kit
軸突生長誘向因子4(Ntn4)ELISA試劑盒 特價供應 ，英文名： Ntn4 ELISA Kit
軸突生長誘向因子1(Ntn1)ELISA試劑盒 特價促銷 ，英文名： Ntn1 ELISA Kit
周期素依賴性激酶7(CDK-7)ELISA試劑盒 進口分裝 ，英文名： CDK-7 ELISA Kit
周期素依賴性激酶5(CDK5)ELISA試劑盒 進口原裝 ，英文名： CDK5 ELISA Kit
周期素依賴性激酶4(CDK-4)ELISA試劑盒 特價供應 ，英文名： CDK-4 ELISA Kit
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DH5α 感受態細胞周期素依賴性激酶1(CDK-1)ELISA試劑盒 進口分裝 ，英文名： CDK-1 ELISA Kit
重組激活基因2(RAG-2)ELISA試劑盒 進口原裝 ，英文名： RAG-2 ELISA Kit
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