公司產(chǎn)品僅用于科研實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
公司產(chǎn)品僅用于科研使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

IFNB1 Others Human 人 Ierferon beta / IFN-beta / IFNB CHO細胞裂解液 (陽性對照) S-乙酰丁二1shēng huà shì jì容量：100毫克

人肝竇內(nèi)皮細胞裂解物HHSECL二二醇單迷 2(2-qthoxyqthoxy)qthcnol 111-90-0

小香豬皮膚細胞;SSC-S2 組織細胞瘤細胞，U-937細胞 NUTU-19細胞，大鼠細胞株嶙酸shēng huà shì jì容量：100克

SV40轉(zhuǎn)染人成骨細胞;hFOB 1.19L-鳥酸乙酯鹽酸鹽shēng huà shì jì容量：1公斤

HA Others H1N3 甲型 H1N3 (A/duck/NZL/160/1976) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 2079-89-23-基富馬酸鹽3-AMINOPROPIOnitnILE FUMARATE
導(dǎo)管瘤細胞;BT-4742,2'-二羥基偶氮苯(>98.0%(T))2,2'-Dihydroxyazobenzene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)

PDPN Others Mouse 小鼠 Podoplanin / PDPN 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) S-乙酰半胱氨酸鹽酸S-Acetamidomethyl-L-cysteine 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

CM-R022大鼠甲狀腺上皮細胞完全培養(yǎng)基100mLO-叔丁基-L-蘇氨酸甲酯鹽酸鹽O-tert-Butyl-L-threonine methyl ester 質(zhì)量規(guī)格：0.98

Raw264.7, 小鼠單核巨噬細胞細胞 牛腎細胞,MDBK細胞 Hs 578Bst(成纖維細胞)L-丙氨酸異丙酯鹽酸鹽L-Alanine isopropyl ester 質(zhì)量規(guī)格：>98%

小鼠腎集合管細胞(SV40轉(zhuǎn)化);M-1L-天冬酰胺甲酯鹽酸鹽Methyl L-asparaginate mono質(zhì)量規(guī)格：0.98
*微內(nèi)皮細胞cDNAHCMEC cDNA溴化膽,從牛脂來(>98.0%(T))Cholesteryl Bromide from Beef Fat質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)

SLPI Others Human  SLPI 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 膽壬酸酯(>89.0%(GC))Cholesterol Pelargonate質(zhì)量規(guī)格：>89.0%(GC)

大鼠小腸隱窩上皮細胞;IEC-6膽壬基碳酸酯Cholesterol Nonyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格：

95-D細胞，高轉(zhuǎn)移細胞 細胞,M2e細胞 正常大鼠腎細胞;NRK膽庚基碳酸酯Cholesterol Heptyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格：

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-A2膽油醇碳酸酯(>70.0%(HPLC))Cholesterol Oleyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格：>70.0%(HPLC)
RWPE-2(人正常細胞) 5×106cells/瓶×2法莫替丁相關(guān)化合物BFamotidine Related Compound B質(zhì)量規(guī)格：美國進口

HBZY-1(大鼠腎小球系膜細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0369IR983F(大鼠*瘤細胞)5×106cells/瓶×2 SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-1非那西丁-乙氧基-2-13CPhenacetin-ethoxy-2-13C質(zhì)量規(guī)格：美國進口

人尿道上皮細胞RNAHUC miRNA5 μg非那西丁-乙氧基-1-13CPhenacetin-ethoxy-1-13C質(zhì)量規(guī)格：美國進口

FLT3LG Others Mouse 小鼠 FLT3L / Flt3 ligand 人細胞裂解液 (陽性對照) 氟西汀Fluoxetine質(zhì)量規(guī)格：美國進口

豬托克特諾病毒（豬細環(huán)病毒）染料法熒光定量PCR試劑盒人主動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL元鹽酸氟西汀Meta Fluoxetine 質(zhì)量規(guī)格：美國進口