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    上海帛科生物技術有限公司
       
       
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    豬鏈球菌通用染料法熒光定量PCR試劑盒
    • 品牌:帛科
    • 產地:進口、國產
    • 貨號:BK-P64587
    • 價格: ¥3800/盒
    • 發布日期: 2021-01-24
    • 更新日期: 2025-09-05
    產品詳請
    產地 進口、國產
    品牌 帛科
    貨號 BK-P64587
    用途 公司產品僅用于科研
    包裝規格 50次
    純度 %
    CAS編號
    是否進口

    實驗注意事項:
    1
    RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
    2
    )客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
    3
    )客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
    4
    )樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。

    產品名稱

    規格

    貨號

    豬鏈球菌通用染料法熒光定量PCR試劑盒

    50

    BK-P64587

    實驗方法步驟:
    方法
    1
    :在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 
    10×PCR buffer 
    5 μl     dNTP mix
    2mM 
    4 μl     
    引物110pM 
    2 μl     
    引物210pM 
    2 μl     Taq
    酶 (2U/μl 
    1 μl     DNA
    模板(50ng-1μg/μl 
    1 μl     
    ddH2O 50 μl 

    PCR實驗步驟:
    取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
    兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%
    ③RNA
    沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
    ④RNA
    清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃7000rpm離心5分鐘。
    ⑤RNA
    干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
    溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
    使用方法:
    一、樣品采集:
    1
    、食品樣品:樣品的采集與預培養按照樣品的采集與預培養按照菌檢驗要求進行。
    2
    、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
    3
    、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
    4
    、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
    一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
    1.
    注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
    2.
    標記 6 個離心管,分別為 765432
    3.
    用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
    4.
    7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
    5.
    換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
    6.
    換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
    7.
    重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

    實時熒光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNARNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
    主要服務:DNARNA*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
    主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

    豬乙酰膽堿(ACh)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           S-2-Benzothiazolyl2-amino-alpha-(methoxyimino)-4-thiazolethiolacetate  80756-85-0  中文名:AE活性酯  分子式:C13H10N4O2S3 

    豬乙酰膽堿(ACh)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Stigmasta-4,22-dien-3-one  55722-32-2  中文名:豆甾-4,22-二烯-3-  分子式:C29H46O  度:關鍵詞:  海棗; 豆甾烷; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫

    豬樣生長因子結合蛋白elisa試劑盒   豬樣生長因子結合蛋白試劑盒   規格型號:96T/48T   豬樣生長因子結合蛋白試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:豬樣生長因子結合蛋白試劑盒、豬樣生長因子結合蛋白eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。  Solanesol  13190-97-1  中文名:茄尼醇  分子式:C45H74O  度:關鍵詞:  抗氧化; 抗菌; 煙草; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫

    豬樣生長因子結合蛋白Ⅱ(IGFBP-Ⅱ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Sarafloxacin   中文名:鹽酸沙拉沙星  分子式:C20H18ClF2N3O3  度:98.0%

    豬樣生長因子結合蛋白3elisa試劑盒   豬樣生長因子結合蛋白3試劑盒   規格型號:96T/48T   豬樣生長因子結合蛋白3試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:豬樣生長因子結合蛋白3試劑盒、豬樣生長因子結合蛋白3eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。     Solanesol  13190-97-1  中文名:茄尼醇  分子式:C45H74O
    大鼠細胞;GH31酸托特羅定(標準品)質量規格:含量測定Tolterodine Tartrate

    MME Others Human  CD10 / MME / Neprilysin 細胞裂解液 (陽性對照) 托吡酯質量規格:>99%,BR,可用于細胞培養Topiramate

    LAN-6 神經母細胞瘤鹽酸布比卡因(標準品)質量規格:標準品,用于含量測定Bupivacaine HCl

    ES-2卵巢透明細胞癌 ES-2 human ovarian clear cell carcinoma McCOY's 5A+10%FBS鹽酸布替萘芬質量規格:>99%,JP16Butenafine HCl

    AIMP1 Protein Mouse 重組小鼠 AIMP1 / EMAP2 / SCYE1 蛋白卡托普利質量規格:>98%,USP34,BR,可用于細胞培養Captopril
    髓母細胞瘤細胞;D341Med1酸二氫錳(>98%,BR)Manganese (II) phosphate monobasic tetrahydrate質量規格:>98%,BR

    KDR Others Rat 大鼠 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 細胞裂解液 (陽性對照) 三糖單水;D-(+)-三糖一水Melezitose monohydrate質量規格:>99%,BC

    Balb/c小鼠*間質干細胞 Balb/c mouse bone marrow mesenchymal stem cells縮節胺(植物激素級)Mepiquat chloride質量規格:>97%,植物激素級

    H4細胞,(H4) 沙門氏菌 *成纖維細胞-心室RNAHCF-av miRNA5 μg1(>38%(HPO3),BR)Metaphosphoric acid質量規格:>38%(HPO3),BR

    SK-MEL-1(皮膚色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2肉桂酸甲酯(>98%,BR)Methyl cinnamate質量規格:>98%,BR
    Repaglinide  中文名:瑞格列奈  分子式:Repaglinide    植物生長激素(GHELISAKit   ELISA.   96T/48T

    Rengyol  中文名:連翹環己醇  分子式:C8H16O3    植物凝脂酸(PAELISAKit   ELISA.   96T/48T

    Rengynic acid  中文名:  分子式:C8H14O4    植物吲哚乙酸(IAAELISAKit   ELISA.   96T/48T           

    Rebeprazole   中文名:雷貝拉唑鈉  分子式:C18H20N3NaO3S    植物血球凝集素M   10mg

    Rasagiline mesylate  中文名:甲磺酸雷沙吉蘭  分子式:3S    PHA-M   25mg

    豬鏈球菌通用染料法熒光定量PCR試劑盒本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

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