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    上海帛科生物技術(shù)有限公司
       
       
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    大腸桿菌通用染料法熒光定量PCR試劑盒(含致病性和非致病性)
    • 品牌:帛科
    • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
    • 貨號:BK-P64707
    • 價格: ¥3800/盒
    • 發(fā)布日期: 2021-01-22
    • 更新日期: 2025-09-05
    產(chǎn)品詳請
    產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
    品牌 帛科
    貨號 BK-P64707
    用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
    包裝規(guī)格 50次
    純度 %
    CAS編號
    是否進口

    公司產(chǎn)品僅用于科研實驗方法步驟:
    方法
    1
    :在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
    10×PCR buffer 
    5 μl     dNTP mix
    2mM 
    4 μl     
    引物110pM 
    2 μl     
    引物210pM 
    2 μl     Taq
    酶 (2U/μl 
    1 μl     DNA
    模板(50ng-1μg/μl 
    1 μl     
    ddH2O 50 μl 

    本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

    產(chǎn)品名稱

    規(guī)格

    貨號

    大腸桿菌通用染料法熒光定量PCR試劑盒(含致病性和非致病性)

    50

    BK-P64707

    PCR實驗步驟:
    取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
    兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
    ③RNA
    沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
    ④RNA
    清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃7000rpm離心5分鐘。
    ⑤RNA
    干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
    溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
    公司產(chǎn)品僅用于科研使用方法:
    一、樣品采集:
    1
    、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
    2
    、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
    3
    、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
    4
    、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
    一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
    1.
    注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
    2.
    標記 6 個離心管,分別為 7,6,54,32。
    3.
    用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
    4.
    7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
    5.
    換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
    6.
    換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
    7.
    重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

    實驗注意事項:
    1
    RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
    2
    )客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
    3
    )客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
    4
    )樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
    實時熒光定量PCRquantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNARNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
    主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
    主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

    CL-0023Ana-1(小鼠巨噬細胞)5×106cells/瓶×2聚蔗糖40010KU

    TDGF1 Others Rat 大鼠 Cripto / TDGF1 人細胞裂解液 (陽性對照) 1紫杉醇 Docetaxel,99% 114977-28-5 25MG 通用試劑

    小鼠卵巢顆粒細胞完全培養(yǎng)基 100mLLB肉湯 LB Broth (Lqnnox)

    MLTC-1小鼠間質(zhì)細胞瘤細胞 MLTC-1 mouse Leydig cell tumor RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS硅烷偶聯(lián)劑KH57010

    IL22 Protein Human 重組人 IL22 / IL-22 / Ierleukin 22 蛋白11028-71-0刀豆球蛋白A(+4)CONCANAVALIN A TYPE III
    癌細胞;MDA-MB-231頭孢克1Cefixime質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

    KLK3 Others Human  KLK3 / PSA / Kallikrein-3 細胞裂解液 (陽性對照) NDSB 256(>98%,BR)NDSB 256質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

    MT-4 急性母細胞細胞NDSB-211NDSB-211質(zhì)量規(guī)格:BR

    A-673 橫紋肌瘤細胞 A-673 rhabdomyoma cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS中性紅染色液Neutral red solution(1X)質(zhì)量規(guī)格:Ind Grade

    TDGF1 Protein Human 重組 Cripto / TDGF1 蛋白 (His 標簽)鎳粉(>99.5%,SP)Nickel powder質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,SP
    小鼠樹突狀細胞細胞;DCS腺苷-5'-1酸三鋰鹽ADP.Li3質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR

    CD300LG Others Human  CLM-9 / EM4 / CD300LG 細胞裂解液 (陽性對照) 赤蘚醇;赤蘚糖醇Erythritol質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

    SK-N-BE(2)神經(jīng)母細胞瘤細胞 SK-N-BE (2) in human neuroblastoma cell MEM 45%+/F12 45%+10% FBS5ˊ-1酸腺苷鋇鹽ADP.Ba質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

    TG-905細胞,腦膠質(zhì)母細胞瘤細胞 熒光假單胞菌 滋養(yǎng)層絨毛細胞總RNAHVT NA1酸腺苷單鉀鹽ADP.K質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR

    RM1(大鼠肌肉成纖維樣細胞) 5×106cells/瓶×2肌苷-5'-1酸二鈉鹽IDP.Na2質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
    CM-H083人臍動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mL膽堿非諾貝特Choline Fenofibrate質(zhì)量規(guī)格:美國進口

    Hepa 1-6, 小鼠細胞丙磺舒?;?span>-D-葡萄糖苷酸Probenecid Acyl β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進口

    人癌細胞;MDA-MB-453 人角膜成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL諾氟沙星-d5Norfloxacin-d5質(zhì)量規(guī)格:美國進口

    大腸桿菌通用染料法熒光定量PCR試劑盒(含致病性和非致病性)人口腔角質(zhì)細胞cDNAHOK cDNA4-含氧諾氟沙星4-Oxo Norfloxacin質(zhì)量規(guī)格:美國進口

    CCL17 Others Mouse 小鼠 CCL17 / TARC 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) N-羥基諾氟沙星N-Hydroxy Norfloxacin質(zhì)量規(guī)格:美國進口

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