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| 產(chǎn)地 | 國(guó)產(chǎn) |
| 保存條件 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | 0001 |
| 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
| 組織來(lái)源 | |
| 細(xì)胞形態(tài) | |
| 是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
| 保質(zhì)期 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書 |
| 器官來(lái)源 | 人源 |
| 免疫類型 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書 |
| 品系 | 原代細(xì)胞 |
| 生長(zhǎng)狀態(tài) | 貼壁 |
| 物種來(lái)源 | 人源 |
| 包裝規(guī)格 | T-25*1瓶 |
| 是否進(jìn)口 | 否 |
注意事項(xiàng)：
該細(xì)胞只可用于科研。出現(xiàn)以下情況不予以重發(fā)：客戶造成細(xì)胞污染；客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好；細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片；細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理；細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知相關(guān)情況。
基本信息：
| 產(chǎn)品名稱 | 人原代細(xì)胞 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5Cells/T25 |
| 種屬 | 人源 | 傳代次數(shù) |
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| 運(yùn)輸 | 常溫 | 貨號(hào) | 0001 |
人原代細(xì)胞是指直接從人體組織或器官中分離、培養(yǎng)的細(xì)胞，未經(jīng)永生化處理或基因改造，保留了原始細(xì)胞的生物學(xué)特性。其來(lái)源廣泛，如皮膚、血液、肝臟、腦組織等組織器官都可作為獲取原代細(xì)胞的來(lái)源。
特點(diǎn)
- 來(lái)源直接：直接取自人體組織，需遵守倫理規(guī)范，如獲得供體的知情同意等。
- 有限增殖能力：在體外分裂次數(shù)有限，通常僅傳代幾次后就會(huì)進(jìn)入衰老或死亡，無(wú)法像細(xì)胞系那樣長(zhǎng)期傳代。
- 異質(zhì)性：同一批原代細(xì)胞可能包含不同亞型的細(xì)胞，如肝細(xì)胞中可能混有庫(kù)普弗細(xì)胞等，需要通過(guò)純化技術(shù)提高純度。
- 生理相關(guān)性高：保留了供體的遺傳背景、表觀特征及代謝功能，實(shí)驗(yàn)結(jié)果更具臨床參考價(jià)值。
培養(yǎng)方法
- 組織塊培養(yǎng)法：將組織切成小塊，接種于培養(yǎng)皿中，加入培養(yǎng)基，讓細(xì)胞從組織塊中遷移出來(lái)并貼壁生長(zhǎng)。
- 消化培養(yǎng)法：利用胰蛋白酶、膠原酶等消化酶將組織消化成單個(gè)細(xì)胞，然后進(jìn)行培養(yǎng)。
- 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法：對(duì)于血液等來(lái)源的懸浮細(xì)胞，直接將細(xì)胞接種于合適的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。
常見(jiàn)類型及應(yīng)用
- 外周血單個(gè)核細(xì)胞：來(lái)源于外周血，主要用于免疫反應(yīng)、病毒感染等方面的研究。
- 肝細(xì)胞：從肝臟組織分離得到，常用于藥物代謝、肝毒性測(cè)試等領(lǐng)域。
- 神經(jīng)元：可從腦組織或誘導(dǎo)多能干細(xì)胞中獲得，用于神經(jīng)退行性疾病研究等。
公司出售的產(chǎn)品： 小鼠乳腺上皮細(xì)胞 人原代骨微內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基 小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞 角質(zhì)細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基（D-KSFM ） 小鼠脊髓神經(jīng)元細(xì)胞 NeuroGro 神經(jīng)元培養(yǎng)基 小鼠雪旺細(xì)胞 CO? 獨(dú)立培養(yǎng)基 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞 F12 培養(yǎng)基 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞 MEM（無(wú)酚紅 ） 培養(yǎng)基 小鼠少突膠質(zhì)細(xì)胞 人原代細(xì)胞McCoy’s 5A 培養(yǎng)基 小鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞 AIM-V 細(xì)胞培養(yǎng)基 小鼠腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 MEM 培養(yǎng)基
細(xì)胞操作步驟:
傳代步驟：
棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1 - 2次。
加2ml消化液（0.25% Trypsin - 0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 - 2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
按6 - 8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1 - 2mL培養(yǎng)液后吹勻。
將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
復(fù)蘇步驟：
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1 - 2mL培養(yǎng)基后吹勻。換液并檢查細(xì)胞密度。
凍存步驟：
以T25瓶為例：
細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1 - 2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
1000RPM離心5分鐘去掉上清，用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
將凍存管置于程序降溫盒中，放入 - 80℃冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存，記錄凍存管位置以便下次拿取。
