實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實(shí)時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

豬C反應(yīng)蛋白elisa試劑盒   豬C反應(yīng)蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬C反應(yīng)蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬C反應(yīng)蛋白試劑盒、豬C反應(yīng)蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Silodosin  中文名：西洛多辛  分子式：C25H32F3N3O4 

豬C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  tert-Butyl rosuvastatin  中文名：  分子式：C26H36FN3O6S  度：98.0%

豬C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Sorafenib tosylate  475207-59-1  中文名：索拉非尼  分子式：C28H24ClF3N4O6S  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

豬B細(xì)胞瘤因子2elisa試劑盒   豬B細(xì)胞瘤因子2試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬B細(xì)胞瘤因子2試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬B細(xì)胞瘤因子2試劑盒、豬B細(xì)胞瘤因子2eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Teriflunomide  163451-81-8  中文名：特立氟胺  分子式：C12H9F3N2O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

豬B細(xì)胞瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  tert-Butyl rosuvastatin  中文名：  分子式：C26H36FN3O6S
HL-60, 早幼粒細(xì)胞熊果酸；烏蘇酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Ursolic acid

IL17RA Others Mouse 小鼠 IL17RA / IL17R / CD217 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 香葉木素質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BRDiosmetin

EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞(傣族);KM9405氯化熒光素(>90.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>90.0%(HPLC)Fluorescein Chloride

GP2-293Luc細(xì)胞，胚腎上皮包裝細(xì)胞 綠猴恒河猴腎細(xì)胞,LLC-MK2細(xì)胞 CL-0348Hce-8693(盲腸腺癌細(xì)胞(未分化))5×106cells/瓶×22',7'-二氯熒光素(>95.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)2',7'-Dichlorofluorescein

BC-021(癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×22,3-二氨基萘(>98.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)2,3-Diaminonaphthalene
胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]格列喹酮Gliquidone質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

LSAMP Others Human  LSAMP 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 格列喹酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Gliquidone質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

HEC-1-A 內(nèi)膜腺癌細(xì)胞參皂苷Rf(標(biāo)準(zhǔn)品)Ginsenoside Rf質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

Caki-1腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞 Caki-1 in human renal clear cell carcinoma of skin metastasis cell McCOY's 5A+10%FBS參皂苷Rg1(標(biāo)準(zhǔn)品)Ginsenoside Rg1質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

TNFSF11 Protein Human 重組 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(R型)參皂苷Rg2（標(biāo)準(zhǔn)品）20(R)Ginsenoside Rg2質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
Fexofenadine   中文名：鹽酸非索非那定  分子式：C32H40ClNO4    高致病性豬藍(lán)耳病病毒(PRRSV-M)*試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

Fenticonazole nitrate  中文名：硝酸芬替康唑  分子式：C24H21Cl2N3O4S    高致病性豬藍(lán)耳病病毒(PRRSV-M)*試劑盒(-PCR法)   48T

Fenofibric acid  中文名：非諾貝特酸  分子式：C17H15ClO4    病毒(CSFV)*試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T              

Fenbendazole  中文名：芬苯達(dá)唑  分子式：C15H13N3O2S    豬鏈球菌Ⅱ型(SS-Ⅱ)*試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

馬鈴薯壞疽病菌PCR試劑盒Fenazox  中文名：氨芬酸鈉  分子式：C15H14NNaO4    豬鏈球菌Ⅱ型(SS-Ⅱ)*試劑盒   48T

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。