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    上海帛科生物技術(shù)有限公司
       
       
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    病毒H4亞型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)
    • 品牌:帛科
    • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
    • 貨號:BK-P63228
    • 價格: ¥3800/盒
    • 發(fā)布日期: 2020-12-25
    • 更新日期: 2025-12-08
    產(chǎn)品詳請
    產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
    品牌 帛科
    貨號 BK-P63228
    用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
    包裝規(guī)格 50T
    純度 %
    CAS編號
    是否進口

    實驗注意事項:
    1
    RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
    2
    )客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
    3
    )客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
    4
    )樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。

    產(chǎn)品名稱

    規(guī)格

    貨號

    病毒H4亞型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)

    50T

    BK-P63228

    實驗方法步驟:
    方法
    1
    :在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
    10×PCR buffer 
    5 μl     dNTP mix
    2mM 
    4 μl     
    引物110pM 
    2 μl     
    引物210pM 
    2 μl     Taq
    酶 (2U/μl 
    1 μl     DNA
    模板(50ng-1μg/μl 
    1 μl     
    ddH2O 50 μl 

    PCR實驗步驟:
    取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
    兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
    ③RNA
    沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
    ④RNA
    清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃7000rpm離心5分鐘。
    ⑤RNA
    干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
    溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
    使用方法:
    一、樣品采集:
    1
    、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
    2
    、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
    3
    、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
    4
    、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
    一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
    1.
    注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
    2.
    標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,32。
    3.
    用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
    4.
    7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
    5.
    換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
    6.
    換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
    7.
    重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

    實時熒光定量PCRquantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
    主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
    主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

    人總特異抗原(tPSA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  3,3-Dimethoxy-5α-androstan-17-one  3591-19-3  中文名:3,3-二甲氧基-5α-雄烷-17-  分子式:C21H34O3 

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    人總抗氧化能力(T-AOC)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  3,3',4,4'-Benzophenone tetracarboxylic dianhydride  中文名:3,3',4,4'-二苯甲酮四甲酸二酐  分子式:C17H6O7  度:98.0%

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    CXCL16 Protein Canine 重組狗 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 標(biāo)簽)鹽酸溴己新質(zhì)量規(guī)格:度>99%Bromhexine HCl

    MSTO-211H(細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸布比卡因質(zhì)量規(guī)格:>95%,USPBupivacaine HCl

    大鼠細(xì)胞;UMR-106鹽酸依匹斯汀質(zhì)量規(guī)格:>98%,BREpinastine HCl

    EPHB1 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphB1 / EPHT2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸依匹斯汀(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Epinastine HCl

    腹膜內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)依普利酮質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Eplerenone
    A549/DDP, 肺腺癌耐藥細(xì)胞株 Human硫酸妥布霉素Tobramycin Sulfate質(zhì)量規(guī)格:含量634μg/mg-739μg/mg,BR

    PLA2G1B Others Human  PLA2G1B / PLA2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 硫酸妥布霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)Tobramycin Sulfate質(zhì)量規(guī)格:效價測定

    小膠質(zhì)細(xì)胞RNAHM miRNA5 μg托萘酯Tolnaftate質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP30,BR

    CFD Others Human  CFD / Adipsin 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 拓?fù)涮婵蝶}酸鹽Topotecan HCl質(zhì)量規(guī)格:>99.0%

    SGC-7901 細(xì)胞拓?fù)涮婵蝶}酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)Topotecan HCl質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
    Toltrazuril  69004-03-1  中文名:托曲珠利  分子式:C18H14F3N3O4S    兔球蛋白M(rabbit IgM)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝

    病毒H4亞型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)Paroxetine   78246-49-8  中文名:鹽酸帕羅西汀  分子式:C19H21ClFNO3    兔球蛋白E(rabbit IgE)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝  

    Temozolomide  85622-93-1  中文名:替莫唑胺  分子式:C6H6N6O2    兔白介素17(IL-17)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

    Pyrimethamine  58-14-0  中文名:乙胺嘧啶  分子式:C12H13ClN4    兔乙酰膽堿(ACh)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

    Pentoxyverine   23142-01-0  中文名:枸櫞酸噴托維林  分子式:C26H39NO10    兔去甲上腺素(NA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

    本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

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