免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟：
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其完全覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。

英文名稱   Anti-PCNA-Proliferation Marker
中文名稱  增殖細(xì)胞核抗原抗體
濃    度  1mg/1ml 
規(guī) 格  0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源  Rabbit
克隆類型  polyclonal 
交叉反應(yīng)   Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep, Guinea Pig 
產(chǎn)品類型     一抗
別    名  Cyclin; DNA polymerase delta auxiliary protein; HGCN8729; MGC8367; Mutagen-sensitive 209 protein; Pcna/cyclin; PCNAR; Polymerase delta accessory protein; Proliferating Cell Nuclear Antigen; PCNA_HUMAN.
研究領(lǐng)域    細(xì)胞生物 免疫學(xué) 染色質(zhì)和核信號(hào) 細(xì)胞周期蛋白 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 細(xì)胞類型標(biāo)志物
蛋白分子量   predicted molecular weight: 29kDa
性    狀  Lyophilized or Liquid 
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human PCNA C-terminus
亞    型  IgG 
純化方法  affinity purified by Protein A 
儲(chǔ) 存 液   0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500

抗體制備過程：

1.材料與試劑
  a．提取的動(dòng)物 Ig
  b．弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
  c．青霉素和鏈霉素
  d．實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
  e．其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，殺死實(shí)驗(yàn)活體，采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清（無菌采制）

抗原準(zhǔn)備：
經(jīng)常使用的抗原有：偶聯(lián)多肽、偶聯(lián)的小分子或化合物、天然或重組蛋白等等。
對(duì)可溶性抗原而言，為了增強(qiáng)其免疫原性或改變免疫反應(yīng)的類型、節(jié)約抗原等目的，通常采用加佐劑的方法以刺激機(jī)體產(chǎn)生較強(qiáng)的免疫應(yīng)答。
多克隆抗體和單克隆抗體的區(qū)別：
由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體。而同一種抗原決定簇，在機(jī)體內(nèi)也可以由好幾種克隆來產(chǎn)生抗體，形成好幾種單克隆抗體混雜物，稱為多克隆抗體。多克隆抗體是由異源抗原（大分子抗原、半抗原偶聯(lián)物）刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)，有機(jī)體漿細(xì)胞分泌的一組免疫球蛋白。
效價(jià)測(cè)定：采用瓊脂擴(kuò)散法。
⑴ 將血清倍比稀釋，加入外周孔。
⑵ 中間孔加動(dòng)物 Ig。
⑶ 37℃濕盒瓊擴(kuò)24 小時(shí)后觀察結(jié)果。 

實(shí)驗(yàn)原理：
（1）特異性結(jié)合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞，通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е隆Ｈ欢贵w可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合，直接發(fā)揮中和病毒的作用。 
（2）活補(bǔ)體：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補(bǔ)體。 
（3）結(jié)合細(xì)胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，參與免疫應(yīng)答。 
（4）可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動(dòng)
免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通過及粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。 
（5）具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。 
（6）抗體對(duì)理化因子的與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在 上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
EPHA3 Others Human 人 EphA3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 辛伐他汀二聚體雜質(zhì)Simvastatin Dimer Impurity質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

臍內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)辛伐他汀，1-芘乙酰酯Simvastatin, 1-Pyreneacetyl Ester質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

JK(Jurkat)細(xì)胞，人細(xì)胞瘤細(xì)胞 615小鼠網(wǎng)織細(xì)胞性瘤株,L615細(xì)胞 人平滑肌細(xì)胞裂解物HCSMCL2,3-脫氫辛伐他汀酸鈉鹽2,3-Dehydro Simvastatin Acid  Salt質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

NCI-H2227(人小細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2脫氫辛伐他汀Dehydro Simvastatin質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

Calu-3(人) 5×106cells/瓶×2 CL-0062CHO-K1(倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞亞株)5×106cells/瓶×2 正常小鼠Leydig細(xì)胞;TM36'-羧基辛伐他汀6'-Carboxy Simvastatin質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
FCGR3 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD16 / FCGR3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 磺胺嘧啶Sulfadiazine質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

INS-1 大鼠細(xì)胞N-乙酰基磺胺嘧啶N-Acetyl Sulfadiazine質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞系;CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGF5'-羥基苯卡維地洛5'-Hydroxyphenyl Carvedilol質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

LncaP, 人細(xì)胞O-去甲卡維地洛O-Desmethyl Carvedilol質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

人急性T細(xì)胞細(xì)胞;Jurkat, Clone E6-1 大鼠肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL4'-羥苯基卡維地洛4'-Hydroxyphenyl Carvedilol質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
RK1 Others Mouse 小鼠 kA / RK1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 左旋肉堿；維生素BT；左卡尼汀質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRL(-)-Carnitine

人心肌細(xì)胞cDNAHCM cDNA左卡尼汀;左旋肉堿（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC含量測(cè)定Levocarnitine;L(-)-Carnitine

MX-1細(xì)胞，人癌細(xì)胞 豬腎細(xì)胞系,PK-15細(xì)胞 大隱平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)L-谷氨酸鈉，一水質(zhì)量規(guī)格：>99%L-Glutamic acid mono salt hydrate

VE(人內(nèi)皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2DL-賴氨酸鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRDL-Lysine·HCl

HUtMEC Pellet 人子宮微內(nèi)皮細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 肌細(xì)胞分離液MDSDL-正纈氨酸質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRDL-Norvaline
增殖細(xì)胞核抗原抗體 中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞;CHL[Phe2,Orn8]-催產(chǎn)素質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR[Phe2,Orn8]-Oxytocin

BxPC-3細(xì)胞，人原位胰腺腺癌細(xì)胞 人皮膚纖維微細(xì)胞系,Malmc細(xì)胞 小鼠漿細(xì)胞瘤;MPC-11[Ser4,Ile8]-催產(chǎn)素質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR[Ser4,Ile8]-Oxytocin

HT-1080(人纖維細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2[Tyr34]-甲狀旁腺激素(7-34) 酰胺 (牛)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR[Tyr34]-pTH (7-34) amide (bovine)

Gibco 17104019 Collagenase Type IV 1g[Trp4]-Kemptide質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR[Trp4]-Kemptide

人髓核細(xì)胞裂解物HNPCL（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Coumarin

公司專業(yè)供應(yīng)的抗體，是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品，品質(zhì)*，價(jià)格實(shí)惠，多種規(guī)格供應(yīng)，售后完善。