實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl     Taq酶 （2U/μl）
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl

乙型副傷寒沙門氏菌   大球蓋菇
島青霉   蘇云金芽胞桿菌庫(kù)爾斯塔克亞種Bacillusthuringiensissubsp.kurstaki
枯草芽孢桿菌深黑變種   間型酒香酵母
產(chǎn)短桿菌   圓酵毛殼
*雙歧桿菌   紅曲霉  用于腐乳代替食品色素
PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

兔子轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Agomelatine 中文名：阿戈美拉汀 分子式：C15H17NO2 度：98.0%

兔子轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 2-(Morpholinodithio)benzothiazole  95-32-9 中文名：2-(4-嗎啉基二硫代)苯并噻唑 分子式：C11H12N2OS3 度：98.0% 關(guān)鍵詞：

兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類elisa試劑盒 兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類試劑盒、兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。 Agomelatine  138112-76-2 中文名：阿戈美拉汀 分子式：C15H17NO2

兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/RLAⅢ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Afatinib  850140-72-6 中文名：阿法替尼 分子式：C24H25ClFN5O3

兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/RLAⅢ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  6-Amino-4-hydroxy-2-naphthalenesulfonic acid 中文名：6-氨基-4-羥基-2-萘磺酸 分子式：C10H9NO4S 度：98.0%
Ca Ski(上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2孔雀石綠質(zhì)量規(guī)格：BSMalachite green

FCAR Others Human  FCAR / CD89 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 燦爛綠,亮綠質(zhì)量規(guī)格：BSBrilliant green

tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-3A1酸洗石棉質(zhì)量規(guī)格：ARAsbestos acid washed

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Hubei/2011) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 苊（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)Acenaphthene

Lewis瘤 鋁標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000μg/ml,介質(zhì):1.0 mol/L HNO3）質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,介質(zhì):1.0 mol/L HNO3Aluminum solution
EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴細(xì)胞;B95-8降鈣素，Calcitonin, human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

EFNA3 Others Human  EphrinA3 / EFNA3 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 降鈣素，大鼠Calcitonin, rat質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

侵襲性脈絡(luò)膜色素瘤細(xì)胞;C918降鈣素基因相關(guān)肽（8-37），Calcitonin Gene Related Peptide (8-37), human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

NRP2 Others Human  Neuropilin 2 / NRP2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 降鈣素基因相關(guān)肽Ⅱ，Calcitonin Gene RelatedPeptide II, human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

CM-R058大鼠膀胱上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL降鈣素基因相關(guān)肽，大鼠Calcitonin Gene RelatedPeptide, rat質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
7,8-Dimethoxy-1,3-dihydro-2H-3-benzazepin-2-one  中文名： 分子式：C12H13NO3 度：98.0% 小鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

(1S)-4,5-Dimethoxy-1-[(methylamino)methyl]benzocyclobutane   中文名： 分子式：C12H18ClNO2 度：98.0% 小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

4,5-Dimethoxy-1-cyanobenzocyclobutane  中文名： 分子式：C11H11NO2 度：98.0% 小鼠Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

弧菌PCR檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法）Ivabradine   中文名：鹽酸伊伐布雷定 分子式：C27H37ClN2O5 度：98.0% 小鼠Ⅲ型膠原(ColⅢ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

4-Methoxy-5-(3-morpholinopropoxy)-2-nitrobenzonitrile  中文名： 分子式：C15H19N3O5 度：98.0% 小鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。