實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

嗜血桿菌PCR檢測試劑盒（熒光PCR法）兔基質(zhì)金屬蛋白酶-12(rabbit MMP-12)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  4-Oxododecanedioic acid  30828-09-2  中文名：  分子式：C12H20O5  度：95.0%  關(guān)鍵詞：  植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

兔基質(zhì)金屬蛋白酶-1(rabbit MMP-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  4-Methyl-2-propyl-1H-benzimidazole-6-carboxylic acid  中文名：  分子式：C12H14N2O2  度：98.0%

兔基質(zhì)金屬蛋白酶 2   英文名稱：   Rabbit Maix Metalloproteinase 2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   MMP-2  5-Chlorothiophene-2-carboxylic acid  中文名：  分子式：C5H3ClO2S 

兔基質(zhì)金屬蛋白酶 1   英文名稱：   Rabbit Maix Metalloproteinase 1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   MMP-1  5-Chlorothiophene-2-carboxylic acid  中文名：  分子式：C5H3ClO2S  度：98.0%

兔基質(zhì)金屬蛋白9（MMP-9）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  4-O-(3-nitropropanoyl)corollin  122475-42-7  中文名：  分子式：C18H24N4O18  度：%  關(guān)鍵詞：
CD302 Others Rat 大鼠 CD302 / CLEC13A 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 三氯生質(zhì)量規(guī)格：>97%,BRTriclosan

Balb/c小鼠*間質(zhì)干細(xì)胞 Balb/c mouse bone marrow mesenchymal stem cells刃天青/樹脂天青/刃天青鈉質(zhì)量規(guī)格：BR,美國biofer進(jìn)分Resazurin

B16細(xì)胞，色素瘤細(xì)胞 植物乳桿菌 白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞;JEG-3/VP16-IL-2替尼泊甙，替尼泊苷質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRTeniposide

ANGPTL1 Protein Canine 重組狗 ANGPTL1 / Angiopoietin-like 1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)替尼泊甙，替尼泊苷（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Teniposide

JeKo-1(套細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 IL12A / NKSF1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 富馬酸替諾福韋酯;泰諾福韋酯質(zhì)量規(guī)格：>98%,富馬酸鹽,BRTenofovir disoproxil fumarate
CD4 Others Human  CD4 / LEU3 (aa 1-208) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 卡鉑-d4Carboplatin-d4質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

CAM191 EBV-轉(zhuǎn)化細(xì)胞N-氧基長春新堿Vincristine N-Oxide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

CL-0094HCC827(非小細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×24-去乙酰基長春新堿甲代硫酸鹽4-Desacetyl Vincristine Methosulfate質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

正常細(xì)胞N-去甲酰-4-去乙酰長春新堿N-Desformyl-4-desacetyl Vincristine質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

原胚腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞;293 Ad5 臍內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLN-甲酰長春堿(長春新堿雜質(zhì)G)N-Formyl Leurosine 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
Cleroindicin F  中文名：  分子式：C8H10O3  度：97.0%  兔子促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

1-chloro-6-(5-ethynylthiophen-2-yl)hexa-3,5-diyn-2-ol  中文名：  分子式：C12H7ClOS  度：%  兔子促黃體激素(LH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

2-(4-Chloro-3-hydroxy-1-butynyl)-5-(1,3-pentadiynyl)thiophene  中文名：  分子式：C13H9ClOS  度：98.0%  兔子雌二醇(E2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Ethyl β-D-fructofuranoside  中文名：乙基-β-D-果糖苷  分子式：C8H16O6  度：97.0%  兔子腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Methyl β-D-fructofuranoside  中文名：甲基-β-D-果糖苷  分子式：C7H14O6  度：%  兔子促甲狀腺素(TSH)ELISAKit   ELISA.   96T/48T