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    上海帛科生物技術(shù)有限公司
       
       
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    三日PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)
    • 品牌:帛科
    • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
    • 貨號:BK-P63537
    • 價格: ¥3800/盒
    • 發(fā)布日期: 2020-11-27
    • 更新日期: 2025-09-10
    產(chǎn)品詳請
    產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
    品牌 帛科
    貨號 BK-P63537
    用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
    包裝規(guī)格 50T
    純度 %
    CAS編號
    是否進口

    本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

    產(chǎn)品名稱

    規(guī)格

    貨號

    三日PCR檢測試劑盒(熒光PCR)

    50T

    BK-P63537

    實驗方法步驟:
    方法
    1
    :在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
    10×PCR buffer 
    5 μl     dNTP mix
    2mM 
    4 μl     
    引物110pM 
    2 μl     
    引物210pM 
    2 μl     Taq
    酶 (2U/μl 
    1 μl     DNA
    模板(50ng-1μg/μl 
    1 μl     
    ddH2O 50 μl 

    PCR實驗步驟:
    取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
    兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%
    ③RNA
    沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
    ④RNA
    清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃7000rpm離心5分鐘。
    ⑤RNA
    干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
    溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
    使用方法:
    一、樣品采集:
    1
    、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
    2
    、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
    3
    、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
    4
    、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
    一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
    1.
    注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
    2.
    標(biāo)記 6 個離心管,分別為 765432
    3.
    用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
    4.
    7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
    5.
    換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
    6.
    換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
    7.
    重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

    線粒體復(fù)合物V蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25  2-[(6-Chloro-3,4-dihydro-3-methyl-2,4-dioxo-1(2H)-pyrimidinyl)methyl]benzonitrile  865758-96-9  中文名:  分子式:C13H10ClN3O2  度:98.0%  關(guān)鍵詞: 

    線粒體復(fù)合物I蛋白共沉淀分析試劑盒5  2-[(Acetylthio)methyl]-phenylpropionic acid  中文名:  分子式:C12H14O3S  度:98.0%

    線粒體復(fù)合物I蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25  22-Dehydroclerosteryl acetate  中文名:  分子式:C31H48O2  度:93.0%

    線粒體復(fù)合物IV蛋白共沉淀分析試劑盒5  2-Acetonaphthone  中文名:2'-萘乙酮  分子式:C12H10O  度:98.0%

    線粒體復(fù)合物IV蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25  2-Allylphenol  中文名:2-烯丙基酚  分子式:C9H10O  度:98.0%
    CA4 Others Human  CA4 / Car4 / CAIV 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) DAABD-Cl [=4-[2-(二甲氨基)乙氨基磺酰]-7--2,1,3-苯并惡二唑質(zhì)量規(guī)格:用于蛋白質(zhì)組分析,用于高效液相色譜標(biāo)記,熒光染料,用于質(zhì)譜的衍生化試劑DAABD-Cl [=4-[2-(Dimethylamino)ethylaminosulfonyl]-7-chloro-2,1,3-benzoxadiazole]

    大額牛肺細(xì)胞;BFR-L12,3-萘二醛(>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)2,3-Naphthalenedialdehyde

    LAIR2 Others Human  LAIR2 / CD306 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 溴鄰苯三酚紅質(zhì)量規(guī)格:INDBromopyrogallol red

    HSC 細(xì)胞鹽酸副品紅質(zhì)量規(guī)格:BS,用于生物學(xué)染色Basic Fuchsin

    J82膀胱移行細(xì)胞癌 J82 human bladder ansitional cell carcinoma MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS燦爛黃質(zhì)量規(guī)格:INDBrilliant Yellow
    FZD10 Others Mouse 小鼠 FZD10 / Frizzled-10 / CD350 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 利福布丁(標(biāo)準(zhǔn)品)Rifabutin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,標(biāo)準(zhǔn)品

    基質(zhì)細(xì)胞總RNAHHGMC NA利福噴丁Rifapentine質(zhì)量規(guī)格:>97%

    EFNA5 Others Canine 狗 Ephrin-A5 / EFNA5 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 利福噴丁(標(biāo)準(zhǔn)品)Rifapentine質(zhì)量規(guī)格:含量測定

    二氫葉酸還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO/dhFr-利魯唑Riluzole質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

    SW1990細(xì)胞,*癌細(xì)胞 胸膜瘤細(xì)胞,SMC-1細(xì)胞 雜交瘤(B);Z51B3C10H12A12G2F7E7利魯唑(標(biāo)準(zhǔn)品)Riluzole質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
    L-Aspartic acid  中文名:L-天門冬氨酸  分子式:C4H7NO4  度:98.0%  小鼠白介素17(IL-17)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

    3,3',4,4'-Benzophenone tetracarboxylic dianhydride  中文名:3,3',4,4'-二苯甲酮四甲酸二酐  分子式:C17H6O7  度:98.0%  小鼠白介素18(IL-18)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

    1,2-Benzisothiazolin-3-one  中文名:1,2-苯并異噻唑-3-  分子式:C7H5NOS  度:98.0%  人凝血酶(TM)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

    Benzoin methyl ether  中文名:安息香甲基醚  分子式:C15H14O2  度:98.0%  人凝血因子Ⅶ(F)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

    Benzanthrone  中文名:苯并蒽酮  分子式:C17H10O  度:98.0%  人可溶性白細(xì)胞抗原G(sHLA-G)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

    實驗注意事項:
    1
    RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
    2
    )客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
    3
    )客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
    4
    )樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
    實時熒光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNARNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
    三日PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
    主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

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