實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實(shí)時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

兔結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  5,6-Dihydro-6-methyl-4H-thieno[2,3-b]thiopyran-4-one  中文名：  分子式：C8H8OS2  度：98.0%

兔結(jié)締組織生長因子(rabbit CTGF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate  239463-72-0  中文名：  分子式：C22H25N3O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  5-(1-Piperazinyl)benzofuran-2-carboxamide  183288-46-2  中文名：  分子式：C13H15N3O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔交聯(lián)物(PY)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  4-Chloro-6-iodoquinazoline  98556-31-1  中文名：  分子式：C8H4ClIN2 

兔交聯(lián)物(PY)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  4-Bromomethyl-2-cyanobiphenyl  中文名：  分子式：C14H10BrN  度：98.0%
FLT1 Others Rat 大鼠 VEGFR1 / FLT-1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (1RS)-1-(6-甲氧-2-萘基)乙醇(萘普生雜質(zhì)K)(1RS)-1-(6-Methoxy-2-naphthyl)ethanol (Naproxen Impurity K)質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

胎盤羊膜細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)6'-甲氧基-2'-萘乙酮 (萘普生雜質(zhì) L)6'-Methoxy-2'-acetonaphthone (Naproxen Impurity L)質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

Jurkat D,E細(xì)胞，T瘤轉(zhuǎn)基因細(xì)胞 615小鼠株,Ca759細(xì)胞 多聚賴氨酸10 mg/mlPLL(S)-普拉克索二鹽酸化物(S)-Pramipexole Di質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

NCI-H295R(腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2(R)-普拉克索二鹽酸化物(R)-Pramipexole Di質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

C127(小鼠癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M124小鼠脈絡(luò)膜細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL 腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤;U-87 MG [U87MG;U87 MG]N-去甲基長春花堿N-Desmethyl Vinblastine質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
CD48 Others Rat 大鼠 CD48 / SLAMF2 / BCM1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 米氮平Mirtazapine質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

兔*間質(zhì)干細(xì)胞 Rabbit bone marrow mesenchymal stem cells米氮平(標(biāo)準(zhǔn)品)Mirtazapine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

SF-295細(xì)胞，XG惡性細(xì)胞 毛霉 腸平滑肌細(xì)胞RNAHISMC miRNA5 μg5-氟乳清酸；5-FOA5-Fluoroorotic acid,5-FOA質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

SF126(細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2枸櫞酸莫沙比利(標(biāo)準(zhǔn)品)Mosapride 質(zhì)量規(guī)格：≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品用于含量測定

HCC827(非小細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0385MFC-GFP(小鼠前細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記))5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1枸櫞酸莫沙比利Mosapride 質(zhì)量規(guī)格：≥98.5%,BR,二水合物
1,6-Dioxaspiro[4.5]decan-2-methanol  中文名：  分子式：C9H16O3  度：98.0%  兔子端粒酶(TE)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

(S,E)-Deca-2,9-diene-4,6-diyne-1,8-diol  中文名：  分子式：C10H10O2  度：%  兔子凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

A組乙型溶血性鏈球菌PCR檢測試劑盒（熒光PCR法）D-arabinitol  中文名：  分子式：C5H12O5  度：%  兔子凋亡信號調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝         

3-(Hydroxymethyl)cyclopentanone  中文名：  分子式：C6H10O2  度：%  兔子膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

12-Hydroxyjasmonic acid  中文名：12-羥基酸  分子式：C12H18O4  度：95.5%  兔子單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。