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    上海帛科生物技術(shù)有限公司
       
       
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    腦膜膿毒黃桿菌PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)
    • 品牌:帛科
    • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
    • 貨號:BK-P63342
    • 價(jià)格: ¥3800/盒
    • 發(fā)布日期: 2020-11-24
    • 更新日期: 2025-12-11
    產(chǎn)品詳請
    產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
    品牌 帛科
    貨號 BK-P63342
    用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
    包裝規(guī)格 50T
    純度 %
    CAS編號
    是否進(jìn)口

    本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

    產(chǎn)品名稱

    規(guī)格

    貨號

    腦膜膿毒黃桿菌PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)

    50T

    BK-P63342

    實(shí)驗(yàn)方法步驟:
    方法
    1
    :在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
    10×PCR buffer 
    5 μl     dNTP mix
    2mM 
    4 μl     
    引物110pM 
    2 μl     
    引物210pM 
    2 μl     Taq
    酶 (2U/μl 
    1 μl     DNA
    模板(50ng-1μg/μl 
    1 μl     
    ddH2O 50 μl 

    PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
    取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
    兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%
    ③RNA
    沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
    ④RNA
    清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃7000rpm離心5分鐘。
    ⑤RNA
    干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
    溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
    使用方法:
    一、樣品采集:
    1
    、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
    2
    、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
    3
    、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
    4
    、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
    一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
    1.
    注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
    2.
    標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 765432
    3.
    用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
    4.
    7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
    5.
    換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
    6.
    換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
    7.
    重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

    兔乳鐵傳遞蛋白elisa試劑盒   兔乳鐵傳遞蛋白試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   兔乳鐵傳遞蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔乳鐵傳遞蛋白試劑盒、兔乳鐵傳遞蛋白elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。  5-Androsten-3β-ol-17-one ethyleneketal  7745-40-6  中文名:  分子式:C21H32O3  度:98.0%   

    兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISAkit   ELISA.   96T/48T  5-Aminouracil  932-52-5  中文名:5-氨基尿嘧啶  分子式:C4H5N3O2  度:98.0%   

    兔溶菌酶(LZM)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  5-Aminosalicylic acid  中文名:5-氨基水楊酸  分子式:C7H7NO3  度:98.0%

    兔熱休克蛋白90elisa試劑盒   兔熱休克蛋白90試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   兔熱休克蛋白90試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔熱休克蛋白90試劑盒、兔熱休克蛋白90 elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。  5-Benzimidazolecarboxylic acid  15788-16-6  中文名:5-苯并咪唑甲酸  分子式:C8H6N2O2 

    兔熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           5-Benzoylpentanoic acid  中文名:5-苯甲酰基戊酸  分子式:C12H14O3
    IGSF8 Others Human  PGRL / IGSF8 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 丙硫氧嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品)Propylthiouracil質(zhì)量規(guī)格:含量測定

    EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KMY0906D-核糖-5-1酸二鈉鹽D-Ribose 5-phosphate di salt hydrate質(zhì)量規(guī)格:>85%,美國進(jìn)口

    CNE2細(xì)胞,細(xì)胞(低分化) 小鼠*瘤細(xì)胞,P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]細(xì)胞 蚊源細(xì)胞蘇木色精,蘇木素Hematoxylin質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)分

    NCI-H1650(非小細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2核苷酸5-1酸腺苷鈉鹽;AMP鈉鹽Adenosine 5-monophosphate  salt質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

    Promocell C-24305 Melanocyte Growth Medium M2 (prf), 色素細(xì)胞生長培養(yǎng)基M2型套裝,無酚紅 500mlCTP.Na2;胞苷-5-1酸二鈉鹽CTP.Na2質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
    CGA Others Human  FSH alpha / TSH alpha / CGA 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 戊硫醇(標(biāo)準(zhǔn)品)n-Amyl mercaptan質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC, 99.5% (GC)

    永生化表皮細(xì)胞;HaCaTAmberlite IR-120陽離子交換樹脂(鈉型)AmberliteIR-120質(zhì)量規(guī)格:鈉型

    大鼠肝細(xì)胞;BRL 3A 膽管細(xì)胞型細(xì)胞,HCCC-9810細(xì)胞 C26細(xì)胞,小鼠乙酸戊酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Amyl acetate質(zhì)量規(guī)格:for GC,99.5%(GC)

    6-10B, 細(xì)胞系 Human苯乙酮(標(biāo)準(zhǔn)品) Acetophenone質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,99.5%(GC)

    CES5A Others Mouse 小鼠 CES5 / Carboxylesterase-5 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 偶氮苯(標(biāo)準(zhǔn)品)Azobenzene質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
    Senkyunolide G  中文名:洋川芎內(nèi)酯分子式:C12H16O3  度:兔子可溶性細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

    Senkyunolide C  中文名:洋川芎內(nèi)酯分子式:C12H12O3  度:96.0%  兔子可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

    Docosanoic acid  中文名:二十二烷酸  分子式:C22H44O2  度:兔子可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

    Pilosol A  中文名:  分子式:C13H12O  度:兔子可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體elisa試劑盒   兔子可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   兔子可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體試劑盒、兔子可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。

    Glycerol  中文名:甘油  分子式:C3H8O3  度:兔子睪elisa試劑盒   兔子睪試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   兔子睪試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子睪試劑盒、兔子睪elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。

    腦膜膿毒黃桿菌PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
    1
    RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
    2
    )客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
    3
    )客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
    4
    )樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
    實(shí)時(shí)熒光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNARNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
    主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
    主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

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