實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi)，探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

小鼠8異素(mouse 8-iso-PG)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Benzyl carbamate  621-84-1  中文名：氨基甲酸芐酯  分子式：C8H9NO2 

小鼠8異素(8-iso-PG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Benzidamine   中文名：鹽酸芐達(dá)明  分子式：C19H24ClN3O  度：98.0%

小鼠8異素   英文名稱：   8-isoprostane F2α   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   8-iso-PG  N6-Benzoyl-5'-O-(4,4'-dimethoxytrityl)-2'-deoxyadenosine  64325-78-6  中文名：N6-苯甲酰基-5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-2'-脫氧腺苷  分子式：C38H35N5O6 

小鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷elisa試劑盒   小鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷試劑盒、小鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Benzalazine  中文名：二芐肼  分子式：C14H12N2  度：98.0%

小鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷(8-OHdG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Benzidamine   中文名：鹽酸芐達(dá)明  分子式：C19H24ClN3O
JEG-3(細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 IL-21R / Ierleukin-21 Receptor 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 輪環(huán)藤寧四乙酸/1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7,10-四乙酸Tetraxetan/DOTA/1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid質(zhì)量規(guī)格：>95%

成細(xì)胞;Saos-2p, p’-DDE(標(biāo)準(zhǔn)品)p, p’-DDE質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

PPP3CA Others Human  PPP3CA / 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) p, p’-DDE標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=3%)p, p’-DDE solution質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=3%

CL-0429Romas(瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2敵草腈(標(biāo)準(zhǔn)品)Dichlobenil質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

絨毛膜內(nèi)皮細(xì)胞 胚胎皮膚成纖維細(xì)胞，CCC-ESF-1細(xì)胞 Sol8(小鼠骨骼肌肌肉母細(xì)胞)乙二醇苯(標(biāo)準(zhǔn)品)Ethylene glycol monophenyl ether質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 酞菁銅(II)(β-型)(>90.0%(T))Copper(II) Phthalocyanine (β-form)質(zhì)量規(guī)格：>90.0%(T)

小鼠子細(xì)胞;U14三(1,3-二苯基-1,3-丙二酮基)(1,10-鄰二氮雜菲)銪(Ⅲ)(>95.0%(T))Tris(1,3-diphenyl-1,3-propanedionato)(1,10-phenanthroline)europium(III)質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(T)

METAP2 Others Mouse 小鼠 METAP2 / MAP2 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 3-(2-苯并噻唑基)-7-(二乙氨基)(>98.0%(HPLC)(T))3-(2-Benzothiazolyl)-7-(diethylamino)coumarin質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)

CM-M001小鼠肺微內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL 3-(2-苯并咪唑基)-7-(二乙氨基)(>98.0%(T))3-(2-Benzimidazolyl)-7-(diethylamino)coumarin質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)

Hela, 細(xì)胞系 小鼠成纖維細(xì)胞,3T3TK細(xì)胞 SPA-A1()4,4'-雙(5-甲基-2-苯并惡唑基)芪(升華提)(>96.0%(HPLC))4,4'-Bis(5-methyl-2-benzoxazolyl)stilbene (purified by sublimation)質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(HPLC)
2-Naphthyl N-benzoylphenylalaninate  中文名：2-萘基N-苯甲酰基苯丙氨酸酯  分子式：C26H21NO3  度：98.0%  小鼠胰素樣肽-1(mouse GLP-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  

Benzoyl-L-histidine  中文名：苯甲酰基-L-組氨酸  分子式：C13H13N3O3  度：98.0%  小鼠半乳糖6酯酶elisa試劑盒   小鼠半乳糖6酯酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠半乳糖6酯酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠半乳糖6酯酶試劑盒、小鼠半乳糖6酯酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

1-Benzyl D-aspartate  中文名：D-天冬氨酸1-芐酯  分子式：C11H13NO4  度：98.0%  小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲酸蛋白酶抑制劑elisa試劑盒   小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲酸蛋白酶抑制劑試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲酸蛋白酶抑制劑試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲酸蛋白酶抑制劑試劑盒、小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲酸蛋白酶抑制劑eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

1-Benzyl L-aspartate  中文名：L-天冬氨酸1-芐酯  分子式：C11H13NO4  度：98.0%  小鼠內(nèi)elisa試劑盒   小鼠內(nèi)試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠內(nèi)試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠內(nèi)試劑盒、小鼠內(nèi)eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Benzoyl leuco methylene blue  中文名：芐酰基無(wú)色亞甲基蘭  分子式：C23H23N3OS  度：98.0%  小鼠膜黑龍江立克次體PCR檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法）聯(lián)蛋白elisa試劑盒   小鼠膜聯(lián)蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠膜聯(lián)蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠膜聯(lián)蛋白試劑盒、小鼠膜聯(lián)蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。