實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

小鼠白介素 -10 (mouse IL-10)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   法國(guó) Diaclone     Cabozantinib  中文名：卡博替尼  分子式：C28H24FN3O5 

小鼠白介素 -1 a (mouse IL-1 a )   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   奧地利 Bender     Azathioprine  中文名：硫唑嘌呤  分子式：C9H7N7O2S 

小鼠白蛋白   英文名稱：   Albumin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   ALB  Dexamethasone 21-phosphate di salt  中文名：地塞米松磷酸鈉  分子式：C22H30FO8P 

小鼠八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子4（OCT4）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Candesartan  中文名：坎地沙坦  分子式：C24H20N6O3  度：98.0%

小鼠癌胚抗原elisa試劑盒   小鼠癌胚抗原試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠癌胚抗原試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠癌胚抗原試劑盒、小鼠癌胚抗原elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Bupivacaine   18010-40-7  中文名：鹽酸布比卡因  分子式：C18H29ClN2O  度：98.0%  關(guān)鍵詞：
HA Others H9N2 甲型 H9N2 (A/Hong Kong/1073/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 6α-羥基紫杉醇6α-Hydroxy Paclitaxel質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

惡性多發(fā)性;ERA-2α-腺苷α-Adenosine 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

Spike Others Human coronavirus  spike glycoprotein (aa 1-760) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 腺苷 3’-單1酸鈉鹽Adenosine 3'-monophosphate  salt 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

FaDu 咽鱗癌細(xì)胞腺苷 3',5'-二1酸鈉鹽Adenosine 3',5'-diphosphate  salt 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

Caco-2結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 Caco-2 human colorectal adenocarcinoma cells MEM+20% FBS腺苷 2',5'-二1酸鈉鹽Adenosine 2',5'-diphosphate  salt 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
HMGB1 Others Human  HMGB1 / HMG1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 血紅素(>95%,BR)Hematin質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

敘利亞倉(cāng)鼠皮膚細(xì)胞;GH-S1聚乙二醇800PEG 800質(zhì)量規(guī)格：BR

OPTN Others Human  Optineurin / OPTN 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 炔雌;炔雌醇環(huán)戊Quinestrol質(zhì)量規(guī)格：USP

卵巢微內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)1酸二酯酶 (比活度：>20 U/mg，BC)Phosphodiesterase I from Crotalus adamanteus Venom質(zhì)量規(guī)格：比活度：>20 U/mg，BC

臍平滑肌細(xì)胞 胚肺細(xì)胞，NCI-H1563[H1563]細(xì)胞 MLTC-1(間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞)化丙啶(>95% (HPLC),BC)Propidium iodide質(zhì)量規(guī)格：>95% (HPLC),BC
(tert-Butoxycarbonyl)oxycefcapene pivoxil  105889-80-3  中文名：  分子式：C28H37N5O10S2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

(S,E)-Deca-2,9-diene-4,6-diyne-1,8-diol  931114-98-6  中文名：  分子式：C10H10O2  度：%  關(guān)鍵詞：  聚乙炔; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠高敏狀腺原酸(u-T3)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

(S)-4-Methoxydalbergione  2543-95-5  中文名：(S)-4-甲氧基黃檀醌  分子式：C16H14O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠睪   英文名稱：   testosterone   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TESTO

(S)-4-Benzyl-2-oxazolidinone  90719-32-7  中文名：(S)-4-芐基-2-噁唑烷酮  分子式：C10H11NO2  度：98.0%      小鼠胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子   英文名稱：   thymus and activation regulated chemo-kine   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TARC

豬鏈球菌通用型和2型PCR檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法）(S)-4-(4-Aminobenzyl)-2(1H)-oxazolidinone  152305-23-2  中文名：(s)-4-(4-氨基芐基)-1,3-噁唑烷-2-酮  分子式：C10H12N2O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物   英文名稱：   Thrombin-aithrombin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TAT