實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

兔子凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           7,8-Dimethoxy-1,3-dihydro-2H-3-benzazepin-2-one  中文名：  分子式：C12H13NO3 

兔子膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  7,8-Dimethoxy-1,3-dihydro-2H-3-benzazepin-2-one  73942-87-7  中文名：  分子式：C12H13NO3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔子膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              9,17-Octadecadiene-12,14-diyne-1,11,16-triol  中文名：  分子式：C18H26O3 

兔子單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  7,8-Dimethoxy-1,3-dihydro-2H-3-benzazepin-2-one  73942-87-7  中文名：  分子式：C12H13NO3 

兔子單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Thevetin B  27127-79-3  中文名：  分子式：C42H66O18  度：97.5%  關(guān)鍵詞：
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B4N-乙酰-L-酪氨酸N-Acetyl-L-Tyrosine質(zhì)量規(guī)格：0.98

Bel-7402細(xì)胞，細(xì)胞 胚纖維細(xì)胞系,HEF細(xì)胞 大鼠纖維母細(xì)胞;1/EJ 1-1N-乙酰-L-色氨酸乙酯Ac-Trp-Oet質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,BR

KU812(外周血嗜堿性細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2N-乙酰-DL-色氨酸N-Acetyl-DL-tryptophan質(zhì)量規(guī)格：0.98

Promocell C-28011 Mesenchymal Stem CellAdipogenic Differe. Medium, 間充質(zhì)干細(xì)胞成脂分化培養(yǎng)基(即用型) 100mlN-甲酰-DL-色氨酸Nalpha-Formyl-DL-tryptophan質(zhì)量規(guī)格：0.98

表皮角質(zhì)細(xì)胞-總RNAHEK-a NAL-酪氨酸叔丁酯L-Tyrosine tert-butyl ester 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
CM-M065小鼠腎上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL水楊苷D-(?)-Salicin質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BR

SP2/0, 小鼠*瘤細(xì)胞 小細(xì)胞細(xì)胞,NEI-H209細(xì)胞 ECV304(臍內(nèi)皮細(xì)胞株)水楊苷(標(biāo)準(zhǔn)品)D-(?)-Salicin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠成肌細(xì)胞;C2C12厚樸酚Magnolol質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BR

CDH5 Others Mouse 小鼠 CDH5 / CD144 / VE-Cad 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 厚樸酚(標(biāo)準(zhǔn)品)Magnolol質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-C2埃索美拉唑鎂(三水)Esomeprazole magnesium trihydrate質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
Thiamphenicol  中文名：甲砜霉素  分子式：C12H15Cl2NO5S  度：98.0%  豚鼠組胺(HIS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

柯薩奇病毒B2型PCR檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法）Fenbendazole  中文名：芬苯達(dá)唑  分子式：C15H13N3O2S  度：98.0%  豚鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

  中文名：利多卡因  分子式：C14H22N2O  度：98.0%  豚鼠壞死因子α(TNF-α)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Mepivacaine  中文名：甲哌卡因  分子式：C15H22N2O  度：98.0%  豚鼠表皮生長因子(EGF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

4-Acetamidophenol  中文名：對(duì)乙酰氨基酚  分子式：C8H9NO2  度：98.0%  豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISAKit   ELISA.   96T/48T