技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：同白斑綜合癥病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4.   實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
Cefixime  79350-37-1  中文名：頭孢克肟  分子式：C16H15N5O7S2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠凝血酶敏感蛋白-1   英文名稱：   thrombospondin 1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TSP-1

Cefcapene pivoxil   147816-24-8  中文名：鹽酸頭孢卡品酯  分子式：C23H32ClN5O9S2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠調(diào)節(jié)蛋白   英文名稱：   thrombomodulin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TM

Caudatin  38395-02-7  中文名：告達(dá)庭  分子式：C28H42O7  度：98.5%  關(guān)鍵詞：    小鼠TH糖蛋白   英文名稱：   Mouse Tamm Horsfall Protein   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   THP

Catalponol methylthiomethyl ether  1432057-74-3  中文名：  分子式：C17H22O2S  度：97.5%  關(guān)鍵詞：  四氫萘酮; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠抗酸性0酸酶5   英文名稱：   Mouse Tarate Resista Acid Phosphatase 5   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   AP 5

Catalponol  34168-56-4  中文名：  分子式：C15H18O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  梓; 四氫萘酮; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠尿微量白蛋白（ALB）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
小鼠IgG   英文名稱：    immunoglobulin G   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IgG  Benzyl 4-bromophenyl ketone  2001-29-8  中文名：芐基4-溴代苯基酮  分子式：C14H11BrO 

小鼠IgE   英文名稱：    immunoglobulin E   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IgE  Benzyl 4-bromophenyl ketone  2001-29-8  中文名：芐基4-溴代苯基酮  分子式：C14H11BrO  度：98.0%   

小鼠IgA(mouse IgA)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     Ethyl 5-amino-4-cyano-3-(2-ethoxy-2-oxoethyl)thiophene-2-carboxylate  58168-20-0  中文名：  分子式：C12H14N2O4S 

小鼠GRO(mouse GRO)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Benzyl 2-aminoacetate p-sulfonate  1738-76-7  中文名：  分子式：C16H19NO5S  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠Ghrelin(mouse Ghrelin)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Chloramphenicol  中文名：氯霉素  分子式：C11H12Cl2N2O5  度：98.0%
同白斑綜合癥病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)HCPEpiC細(xì)胞，人脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞 小鼠瘤細(xì)胞,Nb2-11細(xì)胞 人前脂肪細(xì)胞-皮下cDNAHPA-s cDNA人參皂苷Ro（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Ginsenoside Ro

PLC/PRF/5(人亞力山大細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2肉豆蔻木脂素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Myrislignan

DLD-1(人腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0222SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS2肉桂醇（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Cinnamyl alcohol

雜交瘤(B類);Z153A2A5B3A12肉桂醛(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：GC≥99%，標(biāo)準(zhǔn)品Cinnamaldehyde

MCAM Others Mouse 小鼠 CD146 / MCAM 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人參皂苷Rg5質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%，對(duì)照品GinsenosideRg5
PK-15(豬腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV Baculovirus-Insect cells ansfected Lysate (positive corol) (denatured)GUANIDINExy7noCHLORIDE鹽酸胍生物技術(shù)級(jí)白色結(jié)晶粉末RTsigma

人巨細(xì)胞細(xì)胞株;Mo7e2′-脫氧尿苷-5′-... 2′-Deoxyuridine 5′-triphosphate sodi... 102814-08-4 25MG 通用試劑

TNFRSF1B Others Human 人 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B (aa 1-268, 196 Met/Arg) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 六基二硅氮烷 Hqxcmqthyldisilczcnq

mCF, 小鼠成纖維細(xì)胞TRYPANBLUESOLUTION,0.4%臺(tái)盼藍(lán)溶液,0.4%組織培養(yǎng)級(jí)100MLCOLD

NIH3T3細(xì)胞，NIH SWISS小鼠胚細(xì)胞 人細(xì)胞,ALVA細(xì)胞 人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞RNAHASMC miRNA5 μg911-77-3Nα-本酰-DL-精酸-4-硝基本胺鹽酸鹽(-20℃)N-Benzoyl-DL-arginine-4-nitnoanilide xy7nochloride