PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：中華鱉球狀病毒PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

Benzoyleneurea  中文名：亞苯甲酰基脲  分子式：C8H6N2O2  度：98.0%  小鼠激酶(PK)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

N-Benzylmaleimide  中文名：N-芐基馬來  分子式：C11H9NO2  度：98.0%  小鼠的牛血清白蛋白殘留檢測ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Benzyl nicotinate  中文名：煙酸芐酯  分子式：C13H11NO2  度：98.0%  小鼠標志物(CA724)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

(R)-(+)-1,1'-Bi-2-naphthol  中文名：(R)-(+)-1,1'-聯-2-萘酚  分子式：C20H14O2  度：98.0%  小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

5-Benzyl L-glutamate  中文名：L-谷氨酸5-芐酯  分子式：C12H15NO4  度：98.0%  小鼠基轉移酶(ALT)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
維生素B2/核黃素   英文名稱：   Human Vitamin B2   規格：   48T/96T   英文縮寫：   VB2  Androstadienedione  897-06-3  中文名：1,4-雄烯二酮  分子式：C19H24O2  度：98.0%  關鍵詞： 

維生素B2（VB2）檢測   Detection of malic dehydrogenase  Androstadienedione  中文名：1,4-雄烯二酮  分子式：C19H24O2  度：98.0%

維生素B1（VB1）檢測   The total amino acid (TAA) detection  Androstanolone 17-benzoate  1057-07-4  中文名：雄諾龍苯甲酸酯  分子式：C26H34O3 

微量游離血紅蛋白測試盒   ace free hemoglobin test case                 Retigabine  150812-12-7  中文名：瑞替加濱  分子式：C16H18FN3O2 

微量游離血紅蛋白（FHb）測定試劑盒（比色法）  Precursor of cefcapene diisopropylanmine salt  中文名：  分子式：C28H42N6O8S2
中華鱉球狀病毒PCR檢測試劑盒說明書HUVEC pre-screened Pellet 人臍內皮細胞(預選型) > 1 mio.cells 角質細胞培養基KM-acf沒食子酸一水物質量規格：>98%,ARGallic acid monohydrate

CL-0389NCI-H1688(人典型小細胞細胞)5×106cells/瓶×21-酮戊二酸二鈉鹽(>98%,BR)質量規格：>98%,BRa-Ketoglutaric acid, di salt, dihydrate

S100A4 Others Mouse 小鼠 S100A4 人細胞裂解液 (陽性對照) 氫氧化鈣(>95%,BR)質量規格：>95%,BRCalcium hydroxide

人無色素睫狀上皮細胞總RNAHNPCEpiC NAN-甲基糠酰羥1酸(>99.0%(HPLC))質量規格：>99.0%(HPLC)N-Methylfurohydroxamic Acid

大耳山羊肺細胞;LDG-1 大鼠主動脈平滑肌細胞，A10細胞 BNL1ME A.7R.1細胞，BALB/C小鼠肝上皮細胞2,2'-二辛可寧酸二鉀鹽水合物(>98.0%(HPLC))質量規格：>98.0%(HPLC)2,2'-Bicinchoninic Acid Dipotassium Salt Hydrate
人成纖維細胞-心房HCF-aa氟氯西林鈉(標準品)質量規格：含量測定，標準品Flucloxacillin

EPHA3 Others Rat 大鼠 EphA3 人細胞裂解液 (陽性對照) 巴利森苷A；派立辛質量規格：HPLC≥98%，標準品Parishin A

非洲綠猴腎細胞;CV-1山楂酸,馬斯里酸質量規格：HPLC≥98%，標準品Maslinic acid

大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化);PC-12(高分化) 肺扁平上皮癌細胞，QG-56細胞 E14細胞，129小鼠ES細胞2-并咪唑-5-磺酸,紫外線吸收劑 UV-T質量規格：>98%2-Phenylbenzimidazole-5-sulfonic acid

KM3, 人細胞 Human3,4-二甲氧基肉桂酸(標準品)質量規格：>98%,標準品3,4-Dimethoxycinnamic acid
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。