PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：錐蟲通用PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

Betaxolol   中文名：鹽酸倍他洛爾  分子式：C18H30ClNO3  度：98.0%  豚鼠端粒酶(TE)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Ciprofloxacin   中文名：鹽酸環丙沙星  分子式：C17H19ClFN3O3  度：98.0%  豚鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Lincomycin   中文名：鹽酸林可霉素  分子式：C18H35ClN2O6S  度：98.0%  豚鼠肝細胞生長因子(HGF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Diphenhydramine   中文名：鹽酸苯海拉明  分子式：C17H22ClNO  度：98.0%  豚鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

   中文名：鹽酸利多卡因  分子式：C14H23ClN2O  度：98.0%  豚鼠端粒酶(TE)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
纖維素酶（CL）測試盒   可見分光光度法   50管/24樣              3-Aminoadamantan-1-ol  中文名：  分子式：C10H17NO 

纖維蛋白原（FIB）測試盒（半自動凝血儀）  Rifampicin  中文名：利福平  分子式：C43H58N4O12 

纖維蛋白原 (Fibrinogen)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝  Atorvastatin calcium  134523-03-8  中文名：阿托伐他汀鈣  分子式：C33H35FN2O5  度：98.0%  關鍵詞： 

纖溶酶原激活劑抑制因子2   英文名稱：   Human Plasminogen Activator Inhibitor 2   規格：   48T/96T   英文縮寫：   PAI2  Aspirin  50-78-2  中文名：阿司匹林  分子式：C9H8O4 

纖溶酶原激活劑抑制因子1   英文名稱：   Human Plasminogen Activator Inhibitor 1   規格：   48T/96T   英文縮寫：   PAI-1  Aspirin  50-78-2  中文名：阿司匹林  分子式：C9H8O4  度：99.0%
錐蟲通用PCR檢測試劑盒說明書HPrSMC Pellet 人類平滑肌細胞團塊 > 1 mio.cells 人星形膠質細胞cDNAHA cDNA芝麻素質量規格：HPLC≥98%，BRSesamin

CL-0106HFL1(人)5×106cells/瓶×2芝麻素(標準品)質量規格：HPLC≥98%,標準品Sesamin

KIR2DL4 Others Human 人 KIR2DL4 / CD158D CHO細胞裂解液 (陽性對照) 槲皮素-3-O-葡萄糖-7-O-鼠李糖苷(標準品)質量規格：HPLC≥98%,標準品Quercetin 3-O-glucoside-7-O-rhamnoside

人表皮色素細胞-淺色素裂解物HELM-l L知母皂苷A3(標準品)質量規格：HPLC(ELSD)>97%，標準品Timosaponin A3

新生牛眼晶體上皮細胞;NBLE 人細胞，SW579細胞 RIN-m5F細胞，小鼠β瘤細胞正十五烷（標準品）質量規格：內標N-PENTADECANE
人前脂肪細胞-皮下HPA-swo7iumMETABISULFITE焦亞鈉(重亞鈉)ACS級白色粉末RTsigma

ERN1 Others Human 人 ERN1 / IRE1 (aa 465-977) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 二苯基 Diphenylcarbinol,99% 91-01-0 25G 通用試劑

長尾綠猴胚胎細胞;4179碳醋胍;碳醋亞安脲;胍碳醋鹽 Gucnidinq ccronctq 293-82-1

HL-7702細胞，肝細胞 人腺癌細胞,LS180細胞 CM-R037大鼠小腸隱窩上皮細胞完全培養基100mLPROTEINMWMARKER,HIGHRANGE蛋白Marker生物技術級液體FROZENsigma

大鼠肺泡巨噬細胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1]577-11-7多庫酯鈉Docusate wo7ium
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。