技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點(diǎn)優(yōu)勢：
1. 特異性：馬毛癬菌PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實(shí)用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
Benzidamine   中文名：鹽酸芐達(dá)明  分子式：C19H24ClN3O  度：98.0%  小鼠內(nèi)皮素-1(mouse Endothelin-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

(R)-4-Benzyl-2-oxazolidinone  中文名：(R)-4-芐基-2-惡唑烷酮  分子式：C10H11NO2  度：98.0%  小鼠噬酸性粒細(xì)胞趨化因子(mouse Eotaxin)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  

Benzyl cinnamate  中文名：肉桂酸苯甲酯  分子式：C16H14O2  度：98.0%  小鼠半乳糖凝集素-9(mouse Galectin-9)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

2-Benzoylbenzoic acid  中文名：2-苯甲酰苯甲酸  分子式：C14H10O3  度：98.0%  小鼠胃泌素(mouse Gasin)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

2-Benzyl-2-(dimethylamino)-4'-morpholinobutyrophenone  中文名：2-芐基-2-(二甲基氨基)-4'-嗎啉基苯基丁酮  分子式：C23H30N2O2  度：98.0%  小鼠Ghrelin(mouse Ghrelin)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝
豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1elisa試劑盒   豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1試劑盒、豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Lenalidomide  191732-72-6  中文名：來那度胺  分子式：C13H13N3O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Aminophylline  中文名：氨茶堿  分子式：C16H24N10O4  度：98.0%

豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Amitraz  中文名：雙甲瞇  分子式：C19H23N3 

豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9elisa試劑盒   豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9試劑盒、豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     Lansoprazole  103577-45-3  中文名：蘭索拉唑  分子式：C16H14F3N3O2S 

豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Aminophylline  中文名：氨茶堿  分子式：C16H24N10O4
馬毛癬菌PCR檢測試劑盒直銷IFNAR1 Others Human 人 IFNAR1 / IFNAR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 春雷霉素;春日霉素; 克死霉質(zhì)量規(guī)格：>60%,BRKasugamycin

小鼠前脂肪細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL土拉霉素A，托拉菌素A,泰拉霉素質(zhì)量規(guī)格：>95%Tulathromycin A

B16-F0-EGFP (穩(wěn)定株)小鼠色素瘤細(xì)胞 B16-F0-EGFP (stable sain) of mouse melanoma cells DMEM+10% FBS+200ug/ml G418拉米夫定質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,USP可用于細(xì)胞培養(yǎng)Lamivudine

IL35 Protein Human 重組人 IL-35 (IL12A & IL27B) 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)拉米夫定(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Lamivudine

WPMY-1(人正常基質(zhì)永生化細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 C2C12, 小鼠肌原細(xì)胞鹽酸三氟拉嗪質(zhì)量規(guī)格：>99%Trifluoperazine dihydrochloride
NR8383 大鼠肺泡巨噬細(xì)胞利克飛龍質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRLicofelone

非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-1靈芝1酸C質(zhì)量規(guī)格：＞95.0%（HPLC）Ganoderenic acid C

SKOV3 [SK-OV-3], 人腺癌細(xì)胞系生物胞素質(zhì)量規(guī)格：>98%,進(jìn)分Biocytin

人B細(xì)胞瘤細(xì)胞;RAMOS 大鼠胰島細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLPU-H71質(zhì)量規(guī)格：>98%,HSP90抑制劑PUH71

外周血白細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)赤蘚紅;赤蘚紅B鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：BSErythrosin B  salt