PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：鄉(xiāng)土旋毛蟲PCR檢測(cè)試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

Averantin  中文名：  分子式：C20H20O7    總蛋白定量測(cè)試盒（帶標(biāo)準(zhǔn)；考馬斯亮蘭法）   Total protein quaitative test kit (with standard; Coomassie brillia blue method)

Avanafil  中文名：阿伐那非  分子式：C23H26ClN7O3    蛋白標(biāo)準(zhǔn)品（總蛋白、白蛋白）   Protein standard (total protein, albumin)

Aurantio-obtusin  中文名：橙黃決明素  分子式：C17H14O7    微量游離血紅蛋白測(cè)試盒   ace free hemoglobin test case              

Atrazine  中文名：阿特拉津  分子式：C8H14ClN5    總谷胱甘肽（T-GSH）/氧化型谷胱甘肽（GSSG）測(cè)定試劑盒（微板法）

Atracurium oxalate  中文名：阿曲庫(kù)胺草酸鹽  分子式：C53H68N2O16    酸性0酸酶（ACP）測(cè)定試劑盒（微板法）
豚鼠白介素12elisa試劑盒   豚鼠白介素12試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豚鼠白介素12試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠白介素12試劑盒、豚鼠白介素12eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     Allitol  中文名：蒜糖醇  分子式：C6H14O6 

豚鼠白介素12B(IL12B)ELISA試劑盒 ，英文名： IL12B ELISA Kit  2-Amino-2',5-dichlorobenzophenone  中文名：2-氨基-2',5-二氯二苯酮  分子式：C13H9Cl2NO  度：99.0%

豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-12/P70 ELISA Kit  2-Allylphenol  1745-81-9  中文名：2-烯丙基酚  分子式：C9H10O  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Allylestrenol  中文名：烯丙雌醇  分子式：C21H32O 

豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISAKIT   ELISA.   96T/48T              Alogliptin  中文名：阿格列汀  分子式：C18H21N5O2
鄉(xiāng)土旋毛蟲PCR檢測(cè)試劑盒說明書IL12A Protein Human 重組人 IL12A / NKSF1 蛋白 (His 標(biāo)簽)羅通定/左旋延胡索乙素/左旋四氫巴馬汀質(zhì)量規(guī)格：≥97%,BRRotundine/ L-Tetrahydropalmatine

WERI-Rb-1(人視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 LX-2, 人肝星形細(xì)胞株利拉萘酯質(zhì)量規(guī)格：>99%,ARLiranaftate

CM-R081大鼠內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL甲基反亞油酸甲酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品Methyl linolelaidate

OLR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 OLR1 / LOX1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 肉豆蔻酸甲酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)Methyl myristate

小鼠背脊髓神經(jīng)元MN-dsc棕櫚酸甲酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC)Methyl palmitate
CST7 Others Human 人 Cystatin-F / CST7 / Cystatin-7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 硼替佐米中間體I質(zhì)量規(guī)格：>97%Bortezomib intermediates I

穩(wěn)定表達(dá)EBNA1的人胚腎細(xì)胞;293E保特佐米蒎烷二醇酯質(zhì)量規(guī)格：>97%BortezoMib Pinanediol Ester

CD38 Others Rat 大鼠 SCARB3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 甲磺司特質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRSuplatast tosilate

人腎管狀上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL1丙基-α-D-吡喃半乳糖苷質(zhì)量規(guī)格：>97%,BRAllyl α-D-galactopyranoside

B16F1細(xì)胞，小鼠色素瘤細(xì)胞 MRC-5(胚肺細(xì)胞) Asp2人胚胎腎細(xì)胞轉(zhuǎn)化細(xì)胞;FC33醋酸布舍瑞林質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRBuserelin Acetate
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。