技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：螺旋體亞種PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4.   實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
Aspergillon A  2239299-08-0  中文名：  分子式：C22H32O    Humanelecon-ansfer-flavoproteinbetapolypeptide,ETFBELISA試劑盒人電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽(ETFB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Convallagenin B  17934-59-7  中文名：鈴蘭皂苷元B  分子式：C27H44O6    組織PI3K激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

Glycoursodeoxycholic acid  64480-66-6  中文名：甘氨熊脫氧膽酸  分子式：C26H43NO5    Humanpeptidemajorhistocompatibilitycomplex,pMHCELISAKit人肽-主要組織相容性復(fù)合體復(fù)合物(pMHC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Periplocin  13137-64-9  中文名：杠柳毒苷  分子式：C36H56O13    兔子可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Periplogenin  514-39-6  中文名：杠柳苷元  分子式：C23H34O5    Human hea fatty acid binding protein (h-FABP) ELISA Kit 人心型脂肪酸結(jié)合蛋白(h-FABP)ELISA試劑盒
兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  2,2-Bis(3-amino-4-hydroxyphenyl)hexafluoropropane  中文名：2,2-雙(3-氨基-4-羥苯基)六氟丙烷  分子式：C15H12F6N2O2  度：98.0%

兔子組織多肽抗原elisa試劑盒   兔子組織多肽抗原試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子組織多肽抗原試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子組織多肽抗原試劑盒、兔子組織多肽抗原eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Aloe-emodin  中文名：蘆薈大黃素  分子式：C15H10O5  度：98.0%

兔子組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Allopurinol  中文名：別嘌醇  分子式：C5H4N4O 

兔子組織多肽抗原(TPA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Albendazole  54965-21-8  中文名：阿苯達(dá)唑  分子式：C12H15N3O2S  度：98.5%  關(guān)鍵詞： 

兔子組織多肽抗原(TPA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              9-Oxooctadeca-10,12-dienoic acid  中文名：  分子式：C18H30O3
螺旋體亞種PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)IL18BP Protein Human 重組人 IL18BPa 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)1,10-鄰二氮雜菲-5,6-二酮(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)1,10-Phenanthroline-5,6-dione

QSG-7701(人正常肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 SK-N-SH(神經(jīng)母細(xì)胞瘤)TPP(=四苯基卟啉)質(zhì)量規(guī)格：銅用超高靈敏分光光度試劑TPP (=Tetraphenylporphyrin)

CL-0204Sf-21(昆蟲(chóng)細(xì)胞)5×106cells/瓶×2TCPP[=四(4-羧苯基)卟吩](>97.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(HPLC)(T)TCPP [=Tetrakis(4-carboxyphenyl)porphyrin]

BGN Others Mouse 小鼠 Biglycan / PG-S1 / BGN 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 偶氮甲堿H(>97.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T)Azomethine H

人星形膠質(zhì)細(xì)胞cDNAHA cDNA5-氮胞苷/阿扎胞苷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Azacitidine (5-Azacytidine)
SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞;hFOB 1.19 人心房肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL蘇旦，英文名或英文縮寫：Sudan black B，級(jí)別：BR，98%，規(guī)格：5克

人腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞RNAHRCEpiC miRNA5 μg(R)-1-(4-拂本基)安 (R)-1-(4-Fluorophqnyl)qthylcminq 374898-01-8

LILRA3 Others Human 人 ILT6 / LILRA3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) L-絲安醋;;;L-β-羌基炳安醋 L-Sqrinq;L-β-xy7noxyclcninq;(S)-2-cMino-3-xy7noxypropionic ccid;(S)-(+)-Sqrinq;L-3-xy7noxy-α-clcninq;Sqr;S 26-42-1

新生牛眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;NBTF氧化硼，英文名或英文縮寫：Boron oxide，級(jí)別：BR，96%，規(guī)格：100毫升

HCT-15細(xì)胞，人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 人眼脈絡(luò)色素瘤細(xì)胞,OCM-1細(xì)胞 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;LoVoN,O-二(基硅烷基)三扶乙酰胺NA