技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。

PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優(yōu)勢：
1. 特異性：托克特諾病毒PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
Antipyrine  60-80-0  中文名：安替比林  分子式：C11H12N2O  度：99.0%      小鼠0酸化蛋白激酶elisa試劑盒   小鼠0酸化蛋白激酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠0酸化蛋白激酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠0酸化蛋白激酶試劑盒、小鼠0酸化蛋白激酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Anthraquinone-2-carboxylic acid  117-78-2  中文名：蒽醌-2-羧酸  分子式：C15H8O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠抗核膜糖蛋白210抗體elisa試劑盒   小鼠抗核膜糖蛋白210抗體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠抗核膜糖蛋白210抗體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠抗核膜糖蛋白210抗體試劑盒、小鼠抗核膜糖蛋白210抗體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Anthraquinone-1,5-disulfonic acid di salt  853-35-0  中文名：蒽醌-1,5-二磺酸二鈉鹽  分子式：C14H6Na2O8S2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶elisa試劑盒   小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶試劑盒、小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Anthraquinone  84-65-1  中文名：蒽醌  分子式：C14H8O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白elisa試劑盒   小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白試劑盒、小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  

Anthraglycoside B  23313-21-5  中文名：大黃素-8-O-葡萄糖苷  分子式：C21H20O10  度：97.5%  關(guān)鍵詞：    小鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
兔子胰島素樣生長因子2elisa試劑盒   兔子胰島素樣生長因子2試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子胰島素樣生長因子2試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子胰島素樣生長因子2試劑盒、兔子胰島素樣生長因子2eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Adenosine 5'-monophosphate  中文名：5'-腺嘌呤核苷酸  分子式：C10H14N5O7P  度：98.0%

兔子胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  5-Benzoylpentanoic acid  4144-62-1  中文名：5-苯甲酰基戊酸  分子式：C12H14O3 

兔子胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1-O-Methylnataloe-emodin  中文名：  分子式：C16H12O5  度：98.0%

兔子胰島素樣生長因子1elisa試劑盒   兔子胰島素樣生長因子1試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子胰島素樣生長因子1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子胰島素樣生長因子1試劑盒、兔子胰島素樣生長因子1eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Adipic dihydrazide  1071-93-8  中文名：己二酸二  分子式：C6H14N4O2 

兔子胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Adenosine 5'-monophosphate  61-19-8  中文名：5'-腺嘌呤核苷酸  分子式：C10H14N5O7P  度：98.0%  關(guān)鍵詞：
托克特諾病毒PCR檢測試劑盒直銷IL1RAPL1 Others Mouse 小鼠 IL-1R8 / IL1RAPL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 沒食子酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Gallic acid

胰凝乳蛋白酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL埃博霉素C質(zhì)量規(guī)格：>98%,BREpothilone C

BEL-7404人細(xì)胞 BEL-7404 human hepatocarcinoma cells 1640+10% FBS沒食子酸丙酯(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Propyl gallate

IL13 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL13 / ALRH 蛋白沒食子酸丙酯質(zhì)量規(guī)格：AR,>99%Propyl gallate

人肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞(HPAEC) ( 5×105 ) rCSC, 大鼠心肌細(xì)胞 Rattus毛萼乙素質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Eriocalyxin B
CCRF-CEM [CCRF CEM]人急性細(xì)胞T細(xì)胞 The CCRF-CEM [CCRF CEM] human acute lymphoblastic leukemia T lymphocytes 1640+10%Hyclone 滅活血清trans-Anethole茴香樟腦10克CP，98%

EGF Protein Human 重組人 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)對基苯磺酸 Sulfanilic acid,≥99.0% 121-57-3 25G 通用試劑

293ET(人胚腎細(xì)胞(SV40T和EBNA1基因修飾細(xì)胞)) 5×106cells/瓶×2 原代心肌細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100ml甘安醋 GLYCINqULTRcPURq 26-40-6

人虹膜色素上皮細(xì)胞cDNAHIPEpiC cDNANEXTGEL5%SOLUTIONNEXT GEL 5%蛋白組學(xué)級透明無色液體RTsigma

小鼠骨髓間充質(zhì)肝細(xì)胞(MMSC-bm)(5×105)63231-69-6分子篩13X型MOLECULAR SIEVE