PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：瑟氏泰勒蟲PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4.   實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

Androstenedione  1963/5/8  中文名：雄烯二酮  分子式：C19H26O2    人脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白elisa試劑盒   人脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒、人脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Boldenone  846-48-0  中文名：寶丹酮  分子式：C19H26O2    人脂肪酸結(jié)合蛋白elisa試劑盒   人脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒、人脂肪酸結(jié)合蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

4-(4-(5-(Aminomethyl)-2-oxooxazolidin-3-yl)phenyl)morpholin-3-one  446292-10-0  中文名：  分子式：C14H17N3O4    人脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒elisa試劑盒   人脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒、人脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

4-Chloro-6-iodoquinazoline  98556-31-1  中文名：  分子式：C8H4ClIN2    人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白elisa試劑盒   人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白試劑盒、人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

5-Formyl-2-furylboronic acid  27329-70-0  中文名：  分子式：C5H5BO4    人髓樣分化因子初次應(yīng)答基因88elisa試劑盒   人髓樣分化因子初次應(yīng)答基因88試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人髓樣分化因子初次應(yīng)答基因88試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人髓樣分化因子初次應(yīng)答基因88試劑盒、人髓樣分化因子初次應(yīng)答基因88 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。
兔子調(diào)節(jié)蛋白elisa試劑盒   兔子調(diào)節(jié)蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子調(diào)節(jié)蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子調(diào)節(jié)蛋白試劑盒、兔子調(diào)節(jié)蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Acid Black 1  1064-48-8  中文名：酸性黑 1  分子式：C22H14N6Na2O9S2  度：99.0%  關(guān)鍵詞： 

兔子調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Acyclovir  59277-89-3  中文名：阿昔洛韋  分子式：5O3 

兔子調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Acetylatractylodinol  61582-39-6  中文名：乙酰蒼術(shù)素醇  分子式：C15H12O3  度：97.5%  關(guān)鍵詞：  抗菌; ; 蒼術(shù); 聚乙炔; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

兔子調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1-Hydroxy-2-methylanthraquinone  6268/9/3  中文名：1-羥基-2-甲基蒽醌  分子式：C15H10O3  度：99.0%  關(guān)鍵詞： 

兔子緊張素1型受體(AT1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1-Cyclopropyl-6,7-difluoro-1,4-dihydro-8-methoxy-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid ethyl ester  中文名：  分子式：C16H15F2NO4  度：98.0%
瑟氏泰勒蟲PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格IL25 Protein Mouse 重組小鼠 IL25 蛋白 (His 標(biāo)簽)天狼猩紅質(zhì)量規(guī)格：BSDirect red 80

人周邊細(xì)胞 (HPNC)( 5×105 ) 小鼠海馬神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(EGFP標(biāo)記) MouseDL-苯甘氨酸(>98%，BC)質(zhì)量規(guī)格：>98%，BCDL-alpha-Phenylglycine

CM-H081人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL丁草胺標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.100mg/ml)質(zhì)量規(guī)格：0.100mg/mlButachlor solution

IFNA2 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNA2 / Ierferon alpha 2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 丁草胺(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,95%Butachlor

人成纖維細(xì)胞HLF丁草胺標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=4%)質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=4%Butachlor solution
SERPINF2 Others Mouse 小鼠 SerpinF2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) N-三苯甲基洛沙坦(洛沙坦雜質(zhì)H)質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口N-Trityl Losartan (Losartan Impurity H)

軟骨細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)洛沙坦-d3質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Losartan-d3

JTB Others Human 人 Jumping anslocation Breakpoi / JTB 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 羧酸洛沙坦質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Losartan Carboxylic Acid

615小鼠網(wǎng)織細(xì)胞性瘤株;L615洛沙坦質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Losartan Carboxaldehyde

SK-LU-1細(xì)胞，人低分化 大鼠腎成纖微細(xì)胞,NRK-49F細(xì)胞 CL-0106HFL1(人)5×106cells/瓶×2MQAE(氯離子熒光探針)質(zhì)量規(guī)格：進(jìn)分N-(Ethoxycarbonylmethyl)-6-methoxyquinolinium bromide
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。