技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：水牛泰勒蟲PCR檢測(cè)試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
Androstadienedione  中文名：1,4-雄烯二酮  分子式：C19H24O2    脂肪酶（LPS）測(cè)定試劑盒（比色法）                 

Androst-5-ene-3β,17β-diol 3,17-diacetate  中文名：雄甾-5-烯-3β,17β-二醇 3,17-二乙酸酯  分子式：C23H34O4    總鐵結(jié)合力（TIBC）測(cè)定試劑盒（比色法）

Androst-5-en-3-ol-7,17-dione acetate  中文名：7-酮基去氫表雄酮醋酸酯  分子式：C21H28O4    髓過氧化物酶（MPO）測(cè)定試劑盒

Androst-2-en-17-one  中文名：5α-雄甾-2-烯-17-酮  分子式：C19H28O    乳酸脫氫酶（LDH）試劑盒（比色法）

Amprolium   中文名：鹽酸氨丙林  分子式：C14H20Cl2N4    乳酸脫氫酶（LDH）試劑盒（微板法）
兔子髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  9-Hydroxy-α-lapachone  22333-58-0  中文名：  分子式：C15H14O4  度：96.0%  關(guān)鍵詞：  梓樹; 萘醌; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

兔子髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1-Actamido-3,5-dimethyladmantane  19982-07-1  中文名：  分子式：C14H23NO  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔子雙氫睪elisa試劑盒   兔子雙氫睪試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子雙氫睪試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子雙氫睪試劑盒、兔子雙氫睪eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     Acetylatractylodinol  中文名：乙酰蒼術(shù)素醇  分子式：C15H12O3 

兔子瘦素(LEP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  9-Methoxy-α-lapachone  中文名：  分子式：C16H16O4  度：%

兔子瘦素(LEP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1'-Acetonaphthone  中文名：1'-萘乙酮  分子式：C12H10O  度：98.0%
水牛泰勒蟲PCR檢測(cè)試劑盒直銷IL3RA Others Human 人 IL3RA / CD123 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 葡萄糖-6-1酸脫氫酶，硫酸銨懸浮液質(zhì)量規(guī)格：酶活>200 NADP units/mg，BCGlucose-6-phosphate dehydrogenase

CM-H022人成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL蘋果酸脫氫酶(>12,000U/ml，BC)質(zhì)量規(guī)格：>12,000U/ml，BCMalate dehydrogenase

BBOX1 Others Human 人 BBOX1 / Gamma-BBH 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 草甘膦標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=2%)質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=2%N-(Phosphonomethyl)glycine solution

成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)辛(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%Phoxim

恒河猴腎細(xì)胞;RM-1 人細(xì)胞，HPAC細(xì)胞 SGC-7901(胃腺癌細(xì)胞)除草標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=5%)質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=5%Nitrofen solution
人真皮微內(nèi)皮細(xì)胞RNAHDMEC miRNA5 μgβ-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸 3'-1酸鈉鹽水合物質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口β-Nicotinamide adenine dinucleotide 3'-phosphate  salt hydrate

PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 腺嘌呤鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Adenine hydrochloride

家兔腎細(xì)胞;RABK3硫代煙酰胺腺嘌呤二核苷酸質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Thionicotinamide adenine dinucleotide

HIC細(xì)胞，人小細(xì)胞系 熒光素酶轉(zhuǎn)染人成細(xì)胞,U2OS-Luc teT-on細(xì)胞 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;LS 174T [LS174T](R)-9-[2-(二乙基1酰基甲氧基)丙基]腺嘌呤質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口(R)-9-[2-(Diethylphosphonomethoxy)propyl] Adenine

HL-60(人早幼粒急性細(xì)胞) 5×106cells/瓶×27-二去甲基米諾環(huán)素二鹽酸質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口7-Didemethyl Minocycline Dihydrochloride