技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。

PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優(yōu)勢：
1. 特異性：無齒類圓線蟲PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
Afatinib  850140-72-6  中文名：阿法替尼  分子式：C24H25ClFN5O3  度：98.0%      小鼠干擾素 - g (mouse IFN- g )   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   法國 Diaclone

Adynerigenin β-neritrioside  88721-09-9  中文名：  分子式：C42H64O17  度：95.0%  關(guān)鍵詞：  強心苷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠球蛋白 E (mouse IgE)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 ADI  

Adrenosterone  382-45-6  中文名：腎上腺甾酮  分子式：C19H24O3  度：99.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠可溶性瘦素受體elisa試劑盒   小鼠可溶性瘦素受體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠可溶性瘦素受體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠可溶性瘦素受體試劑盒、小鼠可溶性瘦素受體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Adipic dihydrazide  1071-93-8  中文名：己二酸二  分子式：C6H14N4O2  度：99.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基elisa試劑盒   小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基試劑盒、小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Adenosine 5'-monophosphate  61-19-8  中文名：5'-腺嘌呤核苷酸  分子式：C10H14N5O7P  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠顆粒酶elisa試劑盒   小鼠顆粒酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠顆粒酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠顆粒酶試劑盒、小鼠顆粒酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。
兔子基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  (2Z,6Z,10E,14E,18E)-Farnesylfarnesol  90695-03-7  中文名：  分子式：C30H50O  度：96.0%  關(guān)鍵詞：  植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

兔子基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  7-Methoxy-1-naphthaleneacetic acid  6836-22-2  中文名：  分子式：C13H12O3 

兔子基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  7-Keto-dehydroepiandrosterone  566-19-8  中文名：7-酮基去氫表雄酮  分子式：C19H26O3 

兔子基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  (2-Benzothiazolylthio)acetic acid  中文名：2-(苯并噻唑基硫代)乙酸  分子式：C9H7NO2S2  度：98.0%

兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  7-Keto-dehydroepiandrosterone  中文名：7-酮基去氫表雄酮  分子式：C19H26O3  度：98.0%
無齒類圓線蟲PCR檢測試劑盒供應(yīng)LIFR Others Human 人 LIFR / CD118 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2,4-二氨基-6-異丙氧基-1,3,5-三嗪(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)2,4-Diamino-6-isopropoxy-1,3,5-triazine

原代骨骼肌細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100ml2,4-二氨基-1,3,5-三嗪(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)2,4-Diamino-1,3,5-triazine

ROBO4 Others Human 人 ROBO4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2,4-氨基-6-甲氧基-1,3,5-三嗪(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)2,4-Diamino-6-methoxy-1,3,5-triazine

MDCK 狗腎細(xì)胞2,4-二氨基-6-二甲氨基-1,3,5-三嗪(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)2,4-Diamino-6-dimethylamino-1,3,5-triazine

散鱗鏡鯉尾鰭細(xì)胞;YZ21噴昔洛韋-d4質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Penciclovir-d4
THOP1 Others Mouse 小鼠 THOP1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 瓊脂粉25克RT，避光

大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性細(xì)胞;RBL-11-基苯并三唑 1-Aminobenzotriazole 1614-12-6 100MG 通用試劑

MGC80-3細(xì)胞，細(xì)胞 人細(xì)胞,TU212細(xì)胞 正常大鼠腎細(xì)胞;NRK吲哚-3-全酰錄 INDOLq-3-GLYOXYLYL CHLORIDq 980-09-

雜交瘤(B類);Z153A2A5B3A12-N,N-雙(2-乙磺酸)shēng huà shì jì容量：1克

RSPO1 Others Human 人 R-Spondin 1 / RSPO1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鄰本基酚2-pxenylpxenol