技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。

PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優(yōu)勢：
1. 特異性：太米阿米病毒PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
Amitriptyline   549-18-8  中文名：鹽酸阿米替林  分子式：C20H24ClN    0酸化SMAD2/3抗體   英文名稱：   Human Phosphor Mothers Against Decapeaplegic Homolog 2/3 aibody   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   PSMAD2/3 Ab

2-Aminophenyl phenyl sulfone  4273-98-7  中文名：2-氨基二苯砜  分子式：C12H11NO2S    0酸化核因子κB   英文名稱：   Human phosphor-Nuclear Factor kappa B   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   pNFκB

8-Amino-2-naphthalenesulfonic acid  119-28-8  中文名：8-氨基-2-萘磺酸  分子式：C10H9NO3S    羧酸酯酶（CarE）測試盒   可見分光光度法   50管/48樣

2-Amino-5-mercapto-1,3,4-thiadiazole  2349-67-9  中文名：2-氨基-5-巰基-1,3,4-噻二唑  分子式：C2H3N3S2    線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅱ活性測試盒   可見分光光度法   25管/24樣

2-Amino-5-nitrobenzophenone  1775-95-7  中文名：2-氨基-5-硝基二苯甲酮  分子式：C13H10N2O3    線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅲ活性測試盒   可見分光光度法   25管/24樣
兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1,8-Bis(dimethylamino)naphtalene  20734-58-1  中文名：1,8-雙二甲氨基萘  分子式：C14H18N2  度：98.0%   

兔子凝血酶受體elisa試劑盒   兔子凝血酶受體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子凝血酶受體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子凝血酶受體試劑盒、兔子凝血酶受體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。     9,16-Dioxo-10,12,14-octadecatrienoic acid  中文名：  分子式：C18H26O4 

兔子凝血酶受體elisa試劑盒   兔子凝血酶受體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子凝血酶受體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子凝血酶受體試劑盒、兔子凝血酶受體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。     9,10-Bis(3,5-dihydroxyphenyl)anthracene  中文名：9,10-雙(3,5-二羥苯基)蒽  分子式：C26H18O4 

兔子凝血酶受體()ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           9,9-Bis(4-amino-3-methylphenyl)fluorene  中文名：9,9-雙(4-氨基-3-甲苯基)芴  分子式：C27H24N2 

兔子凝血酶受體()ELISAKit   ELISA.   96T/48T              6-Aminoindazole  中文名：6-氨基吲唑  分子式：C7H7N3
太米阿米病毒PCR檢測試劑盒說明書JCA-1細(xì)胞，人細(xì)胞 大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞,L6細(xì)胞 小鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞MOPC普魯士蘭(>98%,BS)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BSPrussian blue

KP-N-NS(人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞()) 5×106cells/瓶×2派洛寧B(Ind)質(zhì)量規(guī)格：>30%,Ind GradePyronin B

A9(小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R019大鼠腮腺細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL 人胚;MRC-5二十五烷(>99.0%(GC)，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)Pentacosane

CM-H119人腦膜細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL正辛酸甲酯(>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))質(zhì)量規(guī)格：>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)Methyl n-Octanoate

SHPK Others Human 人 CARKL / SHPK 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 壬酸甲酯(>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))質(zhì)量規(guī)格：>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)Methyl Nonanoate
NIH/3T3(小鼠胚胎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2磺胺甲惡唑 β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Sulfamethoxazole β-D-Glucuronide

Promocell C-26130 Renal Epithelial Cell GrowthMedium 2 KIT, 腎上皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基2型套裝 500ml頭孢匹羅質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Cefpirome

少突膠質(zhì)前體細(xì)胞培養(yǎng)基OPCM-prf阿米舒必利-d5質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Amisulpride-d5

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/1A/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 美羅培南碳酸鈉質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Meropenem with  carbonate

Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293 001AN-氧基曲唑酮質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Trazodone N-Oxide