PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優(yōu)勢：
1. 特異性：病毒PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

Alogliptin benzoate  850649-62-6  中文名：阿格列汀苯甲酸鹽  分子式：C25H27N5O4    人組織蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

2-[(6-Chloro-3,4-dihydro-3-methyl-2,4-dioxo-1(2H)-pyrimidinyl)methyl]benzonitrile  865758-96-9  中文名：  分子式：C13H10ClN3O2    人組織蛋白酶抗體(CathAb)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Alogliptin  850649-61-5  中文名：阿格列汀  分子式：C18H21N5O2    人組織蛋白酶S(cath-S)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

(-)-Mandelic acid benzyl ester  97415-09-3  中文名：D-(-)-扁桃酸芐酯  分子式：C15H14O3    人組織蛋白去乙酰化酶elisa試劑盒   人組織蛋白去乙酰化酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人組織蛋白去乙酰化酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（分裝），產品別名：人組織蛋白去乙酰化酶試劑盒、人組織蛋白去乙酰化酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

4-(4-Fluorophenyl)-6-isopropyl-2-[(N-methyl-N-methylsulfonyl)amino]pyrimidinyl-5-yl-formyl  147118-37-4  中文名：  分子式：C16H18FN3O3S    人組織蛋白酶抗體elisa試劑盒   人組織蛋白酶抗體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人組織蛋白酶抗體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（分裝），產品別名：人組織蛋白酶抗體試劑盒、人組織蛋白酶抗體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。
兔子可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  (Z)-Lachnophyllum lactone  81122-95-4  中文名：  分子式：C10H10O2  度：%  關鍵詞：  植物提取物; 天然產物; 天然產物庫

兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  8,14-Epoxyergosta-4,22-diene-3,6-dione  1265908-20-0  中文名：  分子式：C28H40O3 

兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              8-Bromo-7-(but-2-yn-1-yl)-3-methyl-1H-purine-2,6(3H,7H)-dione  中文名：  分子式：C10H9BrN4O2 

兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  (tert-Butoxycarbonyl)oxycefcapene pivoxil  中文名：  分子式：C28H37N5O10S2  度：98.0%

兔子可溶性CD40配體elisa試劑盒   兔子可溶性CD40配體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子可溶性CD40配體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（分裝），產品別名：兔子可溶性CD40配體試劑盒、兔子可溶性CD40配體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。     8-Hydroxyhyperforin 8,1-hemiacetal  中文名：  分子式：C35H52O5
病毒PCR檢測試劑盒說明書LAYN Others Human 人 Layilin 人細胞裂解液 (陽性對照) 硫酸鈣(>99%,BR)質量規(guī)格：>99%,BRCalcium sulfate, anhydrous

CM-H084人臍平滑肌細胞完全培養(yǎng)基100mL二環(huán)己基碳二亞胺(>99%,BR)質量規(guī)格：>99%,BRDCC, Dicyclohexylcarbodiimide

SERPINI1 Others Mouse 小鼠 SerpinI1 / Neuroserpin 人細胞裂解液 (陽性對照) 丁二酸二甲酯(>99%,BR)質量規(guī)格：>99%,BRDimethyl succinate

小鼠角膜上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL二甲基甲酮鈉鹽(>97%,BR)質量規(guī)格：>97%,BRDimethylglyoxime  salt

L6565小鼠克隆細胞系 L6565 murine leukemia cell line RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS直接藍71(≥50%,BR)質量規(guī)格：≥50%,BRDirect blue 71
軟骨細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)N-苯甲酰-2'-脫氧胞苷質量規(guī)格：>98%,BRbz-dC

MAP3K8 Others Human 人 TPL2 / MAP3K8 / MEKK8 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) N6-苯甲酰-2'-脫氧腺苷質量規(guī)格：>98%,BRbz-dA

KM小鼠子瘤株;U145'-O-三苯甲基尿苷質量規(guī)格：>97%,BRTrt-rU

NIH/3T3細胞，胚胎成纖維細胞 人高轉移細胞,LM3細胞 CL-0104HEp-2(人喉表皮樣癌細胞)5×106cells/瓶×2Trt-dU質量規(guī)格：>98%,BRTrt-dU

倉鼠腎細胞;BHK-21N2-洛沙坦-洛沙坦(洛沙坦雜質)質量規(guī)格：N2-Losartanyl-losartan (Losartan Impurity)
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。