PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術(shù)服務內(nèi)容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優(yōu)勢：
1. 特異性：葡萄狀穗霉屬通用PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

7-Acetoxy-4-methylcoumarin  中文名：7-乙酰氧基-4-甲基香豆素  分子式：C12H10O4  度：95.0%  小鼠α羥基脫氫酶(αHBDH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Adrenosterone  中文名：腎上腺甾酮  分子式：C19H24O3  度：99.0%  小鼠α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

(1S,2R)-2-Amino-1,2-diphenylethanol  中文名：(1S,2R)-2-氨基-1,2-二苯基乙醇  分子式：C14H15NO  度：98.0%  小鼠α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

2-Acetylbutyrolactone  中文名：2-乙酰基丁內(nèi)酯  分子式：C6H8O3  度：98.0%  小鼠α甘露糖苷酶(αManase)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

2-Amino-9H-fluoren-9-one  中文名：2-氨基-9H-芴-9-酮  分子式：C13H9NO  度：99.0%  小鼠α半乳糖基抗原elisa試劑盒   小鼠α半乳糖基抗原試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠α半乳糖基抗原試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠α半乳糖基抗原試劑盒、小鼠α半乳糖基抗原eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。
兔透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  5-Benzyl L-glutamate  中文名：L-谷氨酸5-芐酯  分子式：C12H15NO4  度：98.0%

兔銅藍蛋白(CP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           5-Benzyl L-glutamate  中文名：L-谷氨酸5-芐酯  分子式：C12H15NO4 

兔A1celisa試劑盒   兔A1c試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔A1c試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔A1c試劑盒、兔A1c elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  5-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-glutamate  中文名：N-(叔丁氧羰基)-L-谷氨酸-5-芐酯  分子式：C17H23NO6  度：98.0%

兔A1c(A1c)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              4-Bromomethyl-2-cyanobiphenyl  中文名：  分子式：C14H10BrN 

兔胎盤生長因子elisa試劑盒   兔胎盤生長因子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔胎盤生長因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔胎盤生長因子試劑盒、兔胎盤生長因子elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。     5-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-glutamate  中文名：N-(叔丁氧羰基)-L-谷氨酸-5-芐酯  分子式：C17H23NO6
葡萄狀穗霉屬通用PCR檢測試劑盒供應MS4A1 Others Human 人 CD20 / MS4A1 (aa 213-297) 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-(2-乙基)本磺酰錄shēng huà shì jì容量：RT100克

大鼠表皮色素細胞完全培養(yǎng)基 100mL偏釩酸鈉  metavanadate dihydrate 16519-65-6 100G 通用試劑

LLC-MK2恒河猴腎細胞 Ganges RIver LLC-MK2 monkey kidney cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS愈創(chuàng)木膠;愈創(chuàng)木脂 GuM gucicci;GuM gucicc;Rqsin gucicc;Gucicc; 9000/9/7

IFNA4 Protein Human 重組人 IFNα4 / IFNa4 / Ierferon alpha-4 蛋白 (His 標簽)L-Cysteinemetxylesterxy7nochlorideL-鹽酸半胱酸25克BR，99%

MDA-MB-175VII(人導管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 BRL 3A(大鼠肝細胞)1271-42-7二茂鐵Ferrocenecarboxylic acid
ACVR2B Others Mouse 小鼠 ACVR2B 人細胞裂解液 (陽性對照) NEXTGEL12.5%SOLUTIONNEXT GEL 12.5%蛋白組學級透明無色液體RTsigma

皮膚肥大細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)3-安基-9-基咔坐;3-安基-9-基卡巴坐;3-安基-9-基氮雜芴 3-cMino-9-qthylccrbczolq;cqC 2013/3/1

EFNB1 Others Rat 大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 人細胞裂解液 (陽性對照) BIS-TRISBis-Tris超級白色結(jié)晶粉末RTsigma

大鼠腎管狀上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL1,5-Dixy7noxy1,5-奈二酚1毫克AR，10%

Y3-Ag 1.2.3大鼠細胞 Myeloma cells in Y3-Ag 1.2.3 rats DMEM培養(yǎng)基+10%FBS135-19-32-酚;β-酚;β-羥基;2-羥基2-Naphthol;β-xy7noxy;2-xy7noxy;Isonaphthol;2-Naphthalenol;C.I.37500
反應五要素：
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。