技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。

PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優(yōu)勢：
1. 特異性：塞內(nèi)加谷病毒PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
5α-Androstane-3β,17β-diol  中文名：5α-雄烷二醇  分子式：C19H32O2  度：98.0%  小鼠催乳素(PRL)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

3-O-Methyl-3-methoxymaxterone  中文名：3-O-甲基-3-甲氧基-5α-雄烷二醇  分子式：C21H36O3  度：98.0%  小鼠抵抗素(Resistin)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17-one  中文名：3-乙氧基-雄甾-3,5-二烯-17-酮  分子式：C21H30O2  度：98.0%  小鼠乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

9-Dehydroandrostenedione  中文名：9-去氫雄烯二酮  分子式：C19H24O2  度：98.0%  中文名稱   方法   規(guī)格           

5-Androsten-3β-ol-17-one ethyleneketal  中文名：  分子式：C21H32O3  度：98.0%  小鼠催產(chǎn)素(OT)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
兔骨鈣素(rabbit Osteocalcin)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     6,6'-Di-O-sinapoylsucrose  中文名：6,6'- 二芥子酰基蔗糖  分子式：C34H42O19 

兔骨成型蛋白-2(rabbit BMP-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  6-(5-Chloropyridin-2-yl)-7-hydroxy-6,7-dihydro-5H-pyrrolo[3,4-b]pyrazin-5-one  中文名：  分子式：C11H7ClN4O2  度：98.0%

兔骨保護(hù)素elisa試劑盒   兔骨保護(hù)素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔骨保護(hù)素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔骨保護(hù)素試劑盒、兔骨保護(hù)素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  4-Hydroxy-4-(methoxycarbonylmethyl)cyclohexanone  81053-14-7  中文名：  分子式：C9H14O4 

兔骨保護(hù)素<破骨細(xì)胞抑制因子>   英文名稱：   Rabbit Osteoprotegerin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   OPG  4-Hydroxythiobenzamide  25984-63-8  中文名：  分子式： 

兔骨保護(hù)素(OPG)ELISAKIT   ELISA.   96T/48T  4-Hydroxysapriparaquinone  120278-25-3  中文名：  分子式：C20H26O4
塞內(nèi)加谷病毒PCR檢測試劑盒說明書NGFR Others Human 人 NGFR/ P75 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4,4'-二氨基二苯硫(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品4,4'-Thiodianiline

I型膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL丙位十二內(nèi)酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.5%(GC))質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.5%(GC) γ-Dodecalactone

CAL 27-EGFP(CMV-EGFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人舌鱗癌細(xì)胞 CAL 27-EGFP (CMV-EGFP leiviral consuct stable sain) of human tongue squamous cell carcinoma DMEM+10% FBS苯并［g,h,i］芘(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品Benzo[ghi]perylene

IL21 Protein Mouse 重組小鼠 IL21 / Ierleukin 21 蛋白1-十八1(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)1-Octadecene

人表皮色素細(xì)胞-深色素(HEM)( 5×105 ) MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元 Mouse辛胺(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)n-Octylamine
人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞;786-O [786-0]5-FAM ；5-羧基熒光素質(zhì)量規(guī)格：>95%5-Carboxyfluorescein

HepG2/2-15細(xì)胞，人細(xì)胞 小鼠單核巨噬細(xì)胞細(xì)胞,RAW 264.7細(xì)胞 大耳山羊皮膚細(xì)胞;LDG-3色素(水溶)質(zhì)量規(guī)格：BSNigrosine water soluble

MCF-7(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2色素(醇溶）質(zhì)量規(guī)格：BSNigrosin alcohol soluble

Promocell C-22111 Endothelial Cell GrowthMedium 2 KIT, 內(nèi)皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基2型套裝 500ml7-羥基;傘形花內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：GC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品7-Hydroxycoumarin

人真皮成纖維母細(xì)胞-胎兒HDF-f6,7,8,9脫氫帕潘立酮鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口6,7,8,9 Dehydro Paliperidone Hydrochloride