PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：馬紅球菌PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

4,6-Dichloro-5-nitro-2-propylthiopyrimidine  145783-14-8  中文名：  分子式：C7H7Cl2N3O2S  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

4,6-Dichloro-2-(propylthio)pyrimidin-5-amine  145783-15-9  中文名：  分子式：C7H9Cl2N3S  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠巨噬細胞替代激活相關化學因子1(AmAC-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

4,5-Di-O-caffeoylquinic acid methyl ester  188742-80-5  中文名：4,5-二咖啡酰奎寧酸甲酯  分子式：C26H26O12  度：97.5%  關鍵詞：  抗氧化; 莽草酸; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

4,5-Dimethoxy-1-cyanobenzocyclobutane  35202-54-1  中文名：  分子式：C11H11NO2  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠巨噬細胞炎性蛋白-1α   英文名稱：   Macrophage Inflammatory protein 1α   規格：   48T/96T   英文縮寫：   MIP-1α/CCL3

4,5,6,7-Tetrahydrothieno [3,2,c]pyridine   28783-41-7  中文名：  分子式：C7H10ClNS  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠N-甲基-D-天門冬酸受體亞單位1型   英文名稱：   Mouse N-methyl-D-aspaate receptor 1   規格：   48T/96T   英文縮寫：   NMDA-R1
人轉移因子(TF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  3-(Hydroxymethyl)cyclopentanol  中文名：  分子式：C6H12O2  度：%

人轉移因子(TF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  3-(Boc-Amino)piperidine  309956-78-3  中文名：  分子式：C10H20N2O2  度：98.0%   

人轉移生長因子β1（TGF-β1）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           3-(Hydroxymethyl)cyclopentanol  中文名：  分子式：C6H12O2 

人轉鐵蛋白受體elisa試劑盒   人轉鐵蛋白受體試劑盒   規格型號：96T/48T   人轉鐵蛋白受體試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：人轉鐵蛋白受體試劑盒、人轉鐵蛋白受體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。     3-(Hydroxymethyl)cyclopentanone  中文名：  分子式：C6H10O2 

人轉鐵蛋白受體2(TFR2)酶聯吸附測定試劑盒   Human TFR2 (ansferrin Receptor 2) ELISA Kit  3-(5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate (2R,3R)-2,3-dihydroxysuccinate  239463-85-5  中文名：  分子式：C26H31N3O8  度：98.0%  關鍵詞：
馬紅球菌PCR檢測試劑盒供應RCC-krause細胞，細胞 人細胞,CaSKi細胞 人內根殼細胞總RNAHHIRSC NA幼枝含斷氧化馬錢子甙(標準品)質量規格：HPLC≥98%，標準品Secoxyloganin

非洲綠猴腎細胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-醋酸鈉（標準品）質量規格：HPLC法含量測定 Acetate

FGFR4 Others Human 人 FGFR4 / FGF Receptor 4 人細胞裂解液 (陽性對照) 葡萄糖酸鈉（標準品）質量規格：HPLC法含量測定 gluconate

小鼠B細胞雜交瘤細胞;SH3鹽酸索他洛爾（標準品）質量規格：含量測定Sotalol hydrochloride

ERBB3 Others Rhesus 恒河猴 HER3 / ErbB3 人細胞裂解液 (陽性對照) 地奈德標記13C3質量規格：美國進口Desonide - Labeled 13C3
PI3 Others Human 人 Elafin / WFDC14 / appin-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 固鹽shēng huà shì jì容量：2～8°C50毫克

人T細胞細胞;HuT 78姆沙伯 W HP Chromosorb W-HP

人卵巢成纖維細胞(HOF) ( 5×105 )苯甲基磺酰 sulfonyl Fluoride (≥98.5... 329-98-6 1G 通用試劑

CM-R048大鼠腸巨噬細胞完全培養基100mL二炎酸鹽shēng huà shì jì容量：100克

小鼠色素瘤細胞;B16 小鼠肝實質細胞完全培養基 100mLD-Fructose 250g/500g/1kg/5kg原裝 Amresco 0226
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。