技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點(diǎn)優(yōu)勢：
1. 特異性：變形桿菌屬通用PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實(shí)用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
3-Amino-3-phenyl-1-propanol  14593-04-5  中文名：3-氨基-3-苯基-1-丙醇  分子式：C9H13NO    FDA水解酶試劑盒   可見分光光度法   50管/24樣

DL-2-Amino-n-octanoic acid  644-90-6  中文名：DL-2-氨基正辛酸  分子式：C8H17NO2    土壤酸性蛋白酶試劑盒   可見分光光度法   50管/24樣

Amoxapine  14028-44-5  中文名：阿莫沙平  分子式：C17H16ClN3O    土壤漆酶測試盒   可見分光光度法   50管/48樣           

6-Aminoquinoxaline  6298-37-9  中文名：6-氨基喹喔啉  分子式：C8H7N3    突觸核蛋白   英文名稱：   Human α Synucleinα   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   α-SYN

6-Aminonicotinic acid  3167-49-5  中文名：6-氨基煙酸  分子式：C6H6N2O2    血清鐵蛋白   英文名稱：   ferritin in serum   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   SF
人單胺氧化酶(MAO)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Timosaponin B-II  136656-07-0  中文名：知母皂苷B-II  分子式：C45H76O19 

人補(bǔ)體因子4(C4)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human C4 (Compleme Compone 4) ELISA Kit  3,6'-Disinapoylsucrose  中文名：3,6'- 二芥子?；崽?/span>  分子式：C34H42O19  度：98.0%

人表皮轉(zhuǎn)谷酰胺酶(TGM3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human TGM3 (ansglaminase 3, Epidermal) ELISA Kit  3-[4-[(2-Chloro-5-iodophenyl)methyl]phenoxy]tetrahydro-furan  915095-94-2  中文名：  分子式：C17H16ClIO2 

人白介素27(IL-27)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human IL-27 (Ierleukin 27) ELISA Kit  3-[2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-3-quinolinyl-2-propenal  中文名：  分子式：C21H16FNO  度：98.0%

人α2巨球蛋白elisa試劑盒   人α2巨球蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人α2巨球蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人α2巨球蛋白試劑盒、人α2巨球蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。     5-Amino-1-(2-hydroxyethyl)pyrazole  中文名：  分子式：C5H9N3O
變形桿菌屬通用PCR檢測試劑盒供應(yīng)SP2/0, 小鼠細(xì)胞亞甲藍(lán)（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Methylthioninium Chloride Trihydrate

mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓 小鼠精母細(xì)胞，GC-2spd細(xì)胞 Mv.1.Lu(NBL-7)(貂肺上皮細(xì)胞)華法林鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：供HPLC法含量測定用Warfarin

人類原巨核細(xì)胞型細(xì)胞;UT-7華法林鈉質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRWarfarin

CD200R4 Others Mouse 小鼠 CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 洛莫司?。?biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC含量測定Lomustine

小鼠T瘤細(xì)胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA度洛西汀質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Duloxetine
TDGF1 Protein Human 重組人 Cripto / TDGF1 蛋白 (His 標(biāo)簽)偏重亞鉀500克RT

人臍內(nèi)皮細(xì)胞;HUV-EC 人胰腺星狀細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL三基錄硅烷 Chlorotriqthylsilcnq 994-30-9

人癌細(xì)胞;MDA-MB-157異胍 (常規(guī)) Guanidine thiocyanate (≥97.0%) 593-84-0 25G 通用試劑

TYRP1 Others Human 人 P1 / TYRP1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) PEA瓊脂10張/盒

CM-H134人角膜內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL(二甲亞砜)