【產(chǎn)品名稱】: 羅斯河病毒PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Ross River Virus(RRV)RTPCR
【貨號】: BKP4294

【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應避免反復凍融（最多凍融3次）；
u 運輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。

組成及試劑配制:

酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

羅斯河病毒PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。

4-Aminoantipyrine  中文名：4-氨基安替比林  分子式：C11H13N3O    唾液酸（SA）測定試劑盒（帶SA標準）（比色法）                 

4-Amino-3-hydroxybenzoic acid  中文名：4-氨基-3-羥基苯甲酸  分子式：C7H7NO3    鴨子乙酰輔酶A羧化酶(ACC)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

4-Amino-3-hydroxy-1-naphthalenesulfonic acid  中文名：4-氨基-3-羥基-1-萘磺酸  分子式：C10H9NO4S    鴨子酶(CA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

4-Amino-3,5-dichloropyridine  中文名：  分子式：C5H4Cl2N2    鴨子蘋果酸酶(ME)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

4-Amino-2,5-dimethoxy-N-phenylbenzenesulphonamide  中文名：4-氨基-2,5-二甲氧基-N-苯基苯磺酰胺  分子式：C14H16N2O4S    鴨子球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
乳酸（lacticacid）測定試劑盒（測血清、組織等）（比色法）  Rhein  478-43-3  中文名：大黃酸  分子式：C15H8O6  度：98.0%  關鍵詞： 

肉毒桿菌(E/F型)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T                 Withaphysalin A  57423-72-0  中文名：  分子式：C28H34O6 

肉毒桿菌(A/B型)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T  Withaphysalin A  57423-72-0  中文名：  分子式：C28H34O6  度：98.0%  關鍵詞： 

溶酶體相關膜蛋白3   英文名稱：   Human Lysosomal Associated membrane protein 3   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   LAMP3  3-Acetyl-2,5-dichlorothiophene  36157-40-1  中文名：  分子式：C6H4Cl2OS  度：98.0%  關鍵詞： 

溶菌酶標準品   Standard for lysozyme                 Ranitidine   66357-59-3  中文名：鹽酸雷尼替丁  分子式：C13H23ClN4O3S
PTX3 Others Human 人 PTX3 / TNFAIP5 人細胞裂解液 (陽性對照) Fmoc-Tyr(tBu)-OHFmoc-O-叔丁基-L-酪酸500克特，98.5%

BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.11,4-二肖基本;隊二肖基本 1,4-bqnzqnq 9-94-4

NCR1 Others Rat 大鼠 NCR1 / NK-p46 人細胞裂解液 (陽性對照) 水合安嘌呤(-20℃) Mqthotrqxctq 1929-2-

原代神經(jīng)膠質(zhì)細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1mlDodecane正十二烷20毫克AR，98%

ECV-304細胞，人臍內(nèi)皮(具有T24細胞特性) 金黃色葡萄球菌 人牙齦成纖維細胞總RNAHGF NA13007-92-6六羰基ChroMiuM hexacarbonyl
羅斯河病毒PCR檢測試劑盒說明書EB (NBL-4)細胞，牛胚氣管細胞 SW 1088[SW-1088; SW1088](人腦星型細胞) CM-H018人成纖維細胞完全培養(yǎng)基100mL鎘黃，英文名或英文縮寫：Cadmium sulfide，級別：AR，99.5%，規(guī)格：10克

EGF Protein Mouse 重組小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白鱗鉬醋銨 cMMONIUM PHOSPHOMOLYBDcTq HYDRcTq 2473-94-3

MKN-28(人高轉(zhuǎn)移細胞) 5×106cells/瓶×2 腦微內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)芐氧羰基甘酸，英文名或英文縮寫：CBZ-L-Gly，級別：特，99%，規(guī)格：100克

上皮細胞培養(yǎng)基PEpiCMFORMALDEHYDE-FREERNAGELKIT無RNA膠試劑盒RTsigma

SELE Others Rat 大鼠 E-selectin / ELAM-1 / CD62E 人細胞裂解液 (陽性對照) 3374-22-9DL-半胱酸;DL-2-基-3-;DL-半膀胱基酸;DL-β-;DL-脬基酸DL-Cysteine
PCR檢測試劑盒

羅斯河病毒PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。