PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內(nèi)容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優(yōu)勢：
1. 特異性：羌蟲病立克次氏體PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

4-[2-[(3-Ethyl-4-methyl-2-oxo-3-pyrrolin-1-yl)carboxamido]ethyl]benzenesulfonamide  119018-29-0  中文名：  分子式：C16H21N3O4S    RabbitGlucosedependeinsulieleasingpolypeptide,GIPELISAKit 兔子葡萄糖依賴性釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Minoxidil  38304-91-5  中文名：米諾地爾  分子式：C9H15N5O    CLIAKitforATGA/TGABELISAKit大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體規(guī)格：48T/96T

Monobenzone  103-16-2  中文名：莫諾苯宗  分子式：C13H12O2    線粒體復合物IV蛋白共沉淀分析試劑盒5次

Nitrendipine  39562-70-4  中文名：尼群地平  分子式：C18H20N2O6    Rabbitamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40ELISAKit兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(tert-Butoxycarbonyl)oxycefcapene pivoxil  105889-80-3  中文名：  分子式：C28H37N5O10S2    豚鼠白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-1 ELISA Kit
人組織蛋白酶Kelisa試劑盒   人組織蛋白酶K試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人組織蛋白酶K試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人組織蛋白酶K試劑盒、人組織蛋白酶K elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  3',5'-Anhydrothymidine  中文名：3',5'-脫水胸苷  分子式：C10H12N2O4  度：98.0%

人組織蛋白酶K(cath-K)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Thiamphenicol  中文名：甲砜霉素  分子式：C12H15Cl2NO5S 

人組織蛋白酶Delisa試劑盒   人組織蛋白酶D試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人組織蛋白酶D試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人組織蛋白酶D試劑盒、人組織蛋白酶D elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。     3',5'-Anhydrothymidine  中文名：3',5'-脫水胸苷  分子式：C10H12N2O4 

人組織蛋白酶D(cath-D)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  3',5'-Anhydrothymidine  7481-90-5  中文名：3',5'-脫水胸苷  分子式：C10H12N2O4  度：98.0%  關鍵詞： 

人組織蛋白酶B(cath-B)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  3',5'-Anhydrothymidine  7481-90-5  中文名：3',5'-脫水胸苷  分子式：C10H12N2O4
羌蟲病立克次氏體PCR檢測試劑盒直銷R9[PR9]小鼠骨髓基質(zhì)細胞 R9[PR9] mouse bone marrow somal cells 1640+10%FBS+5uM 吉非替尼利福平；利發(fā)霉素質(zhì)量規(guī)格：≥97%,BR,可用于細胞培養(yǎng)Rifampicin

IL12A & IL27B Protein Human 重組人 IL12A & IL27B Heterodimer 蛋白利福平(標準品)質(zhì)量規(guī)格：>98%,標準品Rifampicin

SW 780(人膀胱移行細胞癌) 5×106cells/瓶×2 5637(人細胞)泮托拉唑鈉1.5水合物質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRPantoprazole Sesquihydrate

CM-M099小鼠表皮色素細胞完全培養(yǎng)基100mL泮托拉唑鈉1.5水合物(標準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%，標準品Pantoprazole Sesquihydrate

IFNA13 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNA13 / Ierferon alpha-13 人細胞裂解液 (陽性對照) (S)-10-羥基喜樹堿;10-羥基喜樹堿質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR(s)-10-hydroxycamptothecin
NCI-H446(人小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2白當歸素(標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Byakangelicin

C-33 A(人子細胞) 5×106cells/瓶×2 T-107B中性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL 人導管癌細胞;ZR-75-30白果內(nèi)酯(標準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品(?)-Bilobalide

水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S1白花前胡醇（標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Peucedanol

F11R Others Rat 大鼠 JAM-A / F11R 人細胞裂解液 (陽性對照) 環(huán)杷明;環(huán)巴胺;去氧芥芬胺(標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品;Hh信號通路拮抗劑,作用于SmoCyclopamine

人上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL奧昔布寧N氧化物質(zhì)量規(guī)格：美國進口Oxybutynin N-Oxide
反應五要素：
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。