技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優勢：
1. 特異性：普雷沃菌屬通用PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
3,6'-Disinapoylsucrose  139891-98-8  中文名：3,6'- 二芥子酰基蔗糖  分子式：C34H42O19  度：98.0%  關鍵詞：  ; 遠志; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠甲狀腺球蛋白elisa試劑盒   小鼠甲狀腺球蛋白試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠甲狀腺球蛋白試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠甲狀腺球蛋白試劑盒、小鼠甲狀腺球蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

3,6-Bis(hydroxymethyl)durene  7522-62-5  中文名：3,6-雙(羥甲基)杜烯  分子式：C12H18O2  度：98.0%      小鼠甲狀腺過氧化物酶elisa試劑盒   小鼠甲狀腺過氧化物酶試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠甲狀腺過氧化物酶試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠甲狀腺過氧化物酶試劑盒、小鼠甲狀腺過氧化物酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  

3,5-Di-O-caffeoylquinic acid  2450-53-5  中文名：異綠原酸A  分子式：C25H24O12  度：98.0%  關鍵詞：  *; 抗毒; 莽草酸; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

3,5-Cycloergosta-6,8(14),22-triene  24352-51-0  中文名：  分子式：C28H42  度：%  關鍵詞：  麥角甾烷; 對照品; 標準品; 微生物代謝產物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

3',5'-Anhydrothymidine  7481-90-5  中文名：3',5'-脫水胸苷  分子式：C10H12N2O4  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠舒緩激肽(BK)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
人 Apelin(Apelin)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝  Ampicillin Trihydrate  中文名：氨芐西林三水酸  分子式：C16H19N3O4S  度：98.0%

熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  3-Hydroxycatalponol  中文名：  分子式：C15H18O3  度：97.0%

熱休克蛋白70   英文名稱：   Heat shock protein 70   規格：   48T/96T   英文縮寫：   HSP70  Palmitone  502-73-8  中文名：棕櫚酮  分子式：C31H62O  度：98.0%  關鍵詞： 

熱休克蛋白27   英文名稱：   Heat shock protein 27   規格：   48T/96T   英文縮寫：   HSP27  Palmitone  中文名：棕櫚酮  分子式：C31H62O 

熱休克蛋白 70(HSP70)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝  Panaxydiol  63910-76-9  中文名：  分子式：C17H24O2  度：%  關鍵詞：
普雷沃菌屬通用PCR檢測試劑盒直銷SV40T轉化人臍內皮細胞;PUMC-HUVEC-T1果膠(半乳糖醛酸(干基計)≥74.0 %)質量規格：半乳糖醛酸(干基計)≥74.0 %Pectin

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Hong Kong/483/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 1酸三丁酯(AR,99%)質量規格：AR,99%Tributyl phosphate

CL-0184PANC-1(人細胞)5×106cells/瓶×21酸三丁酯(CP)質量規格：CPTributyl phosphate

TNK2 Others Human 人 ACK1 / TNK2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 1酸三丁酯(標準品)質量規格：分析標準品Tributyl phosphate

人上皮細胞裂解物HMEpiCL3,5-二水楊酸鋰(>98%，BC)質量規格：>98%，BCLithium 3,5-diiodosalicylate
TNFRSF21 Others Human 人 DR6 / TNFRSF21 人細胞裂解液 (陽性對照) N-芐氧羰基-D-色酸，英文名或英文縮寫：CBZ-D-Trp，級別：特，98%，規格：10克

人神經元RNAHN miRNA5 μg均本四加臘酐 1,2,4,5-Bqnzqnqtqtrcccrboxylic cnhydridq 1989/3/7

FCER1A Others Human 人 FcERI / FCER1A 人細胞裂解液 (陽性對照) 米力農相關物質A Milrinonq Rqlctqd CoMpound c;1,6-Dixy7no-2-Mqthyl-6-oxo(3,4'-bipyridinq)-5-ccrboxcMidq 80047-4-1

人內皮細胞完全培養基 100mL四乙酸二基二鈉鹽，英文名或英文縮寫：EDTA-2Na，級別：BR，99%，規格：1克

3T3NIH細胞，小鼠成纖維細胞 HUVEC(人臍內皮細胞) 小鼠細胞;GT1-1GDX　502(聚二本多孔小球)NA