技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。

PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點(diǎn)優(yōu)勢：
1. 特異性：豬環(huán)曲病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
3,4-Dihydro-3,4-dihydroxynaphthalen-1(2H)-one  中文名：  分子式：C10H10O3  度：97.0%  兔子基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

alpha-Terthienylmethanol  中文名：  分子式：C13H10OS3  度：%  兔子基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Eleutheroside C  中文名：  分子式：C8H16O6  度：97.5%  兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Catalpalactone  中文名：  分子式：C15H14O4  度：%  兔子基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Catalponol  中文名：  分子式：C15H18O2  度：98.0%  兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
尿激酶型纖溶酶原激活因子 (uPA)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  O-Benzyl-L-tyrosine  16652-64-5  中文名：O-芐基-L-酪氨酸  分子式：C16H17NO3  度：98.0%   

定性測試盒   Acid esterase stain                 3-Quinuclidinone  中文名：3-奎寧環(huán)酮  分子式：C7H11NO 

內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素   英文名稱：   Visfatin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   Visfatin  Otophylloside T  1642306-14-6  中文名：  分子式：C48H70O18 

內(nèi)脂素 / 內(nèi)臟脂肪素 (Visfatin)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Ondansetron  中文名：昂丹司瓊  分子式：C18H19N3O 

內(nèi)源性糖皮質(zhì)激素   英文名稱：   Human Glucocoicoid Endogenous   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   GC  Androstenediol  521-17-5  中文名：雄烯二醇  分子式：C19H30O2
豬環(huán)曲病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)T24, 人細(xì)胞他扎羅汀（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測定Tazarotene

人細(xì)胞;PC-3 [PC3] 大鼠卵巢成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL他扎羅汀質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRTazarotene

Hepa 1-6 小鼠細(xì)胞靈芝酸D(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Ganoderic acid D

CXADR Others Mouse 小鼠 CXADR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸左西替利嗪（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Levoceitrizine HCl

615小鼠株;Ca761鹽霉素,沙利霉素質(zhì)量規(guī)格：assay 12%~24%Salinomycin
TNFSF11 Protein Human 重組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)SALICYLICACID水楊酸鈉*100G54-21-6RT

大鼠神經(jīng)質(zhì)細(xì)胞(RNsn)(1×106) BxPC-3, 人原位胰腺腺癌細(xì)胞株 Human錄化鉍 Bismuth trichloridq 7787-60-

人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]AIBI偶氮二異基咪唑啉鹽酸鹽500毫克AR

IL1R2 Others Mouse 小鼠 IL1R2 / CD121b 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) TRIS-GLYCInepUFFER,10XSOLUTIONTris-甘酸緩沖液蛋白組學(xué)級1LCOLD

人腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL(多效唑)