技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優(yōu)勢：
1. 特異性：豬嵴病毒庫布病毒PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
3-(1-Piperazinyl)-1,2-benzisothiazole  中文名：  分子式：C11H13N3S  度：98.0%  兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-quinolyl-3-methanol  中文名：  分子式：C19H16FNO  度：98.0%  兔子壞死因子α(TNF-α)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

3-(Bromomethyl)-2-cyclopropyl-4-(4'-fluorophenyl)quinoline  中文名：  分子式：C19H15BrFN  度：98.0%  兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1elisa試劑盒   兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒、兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

3-[2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-3-quinolinyl-2-propenal  中文名：  分子式：C21H16FNO  度：98.0%  兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類elisa試劑盒   兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類試劑盒、兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Pitavastatin ethyl ester  中文名：  分子式：C27H28FNO4  度：98.0%  兔子壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3elisa試劑盒   兔子壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3試劑盒、兔子壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。
可溶性細胞表面分化抗原40配體   英文名稱：   Soluble Cluster of differeiation aigen 40 ligand   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   sCD40L  Dihydrosenkyunolide C  195142-72-4  中文名：二氫洋川芎內(nèi)酯C  分子式：C12H14O3 

可溶性髓系細胞觸發(fā)受體-1   英文名稱：   soluble iggering receptor expressed on myeloid cells-1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   sEM-1  Pazufloxacin mesilate  中文名：甲磺酸帕珠沙星  分子式：C17H19FN2O7S 

可溶性白細胞抗原G   英文名稱：   soluble leukocyte aigen G   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   sHLA-G  Norethindrone  中文名：炔諾酮  分子式：C20H26O2 

可溶性白細胞抗原 G5(sHLA-G5)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  Norfloxacin  70458-96-7  中文名：諾氟沙星  分子式：C16H18FN3O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

可溶性白細胞抗原 G(sHLA-G)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  Norfloxacin  中文名：諾氟沙星  分子式：C16H18FN3O3
豬嵴病毒庫布病毒PCR檢測試劑盒說明書TMUB2 Others Human 人 TMUB2 人細胞裂解液 (陽性對照) 溴藍鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：Ind GradeBromochlorophenol blue  salt

原代腎實質(zhì)細胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100ml溴酚藍鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：BS GradeBromophenol blue,  salt

D341 Med細胞，人髓母細胞瘤 人癌細胞,BCaP-37細胞 心肌細胞培養(yǎng)基CMM-prf吡嗪酰胺（標(biāo)準品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Pyrazinamide

婆羅門牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-3鹽酸地美環(huán)素；去甲基金霉素質(zhì)量規(guī)格：>900μg/mg,BRDemeclocycline hydrochloride

IL2RA Others Human 人 IL2Ra / CD25 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸地美環(huán)素；去甲基金霉素(標(biāo)準品)質(zhì)量規(guī)格：效價測定,標(biāo)準品Demeclocycline hydrochloride
盤羊皮膚細胞;OAM-S13-羥基地氯雷他定質(zhì)量規(guī)格：美國進口3-Hydroxy Desloratadine

DLD-1細胞，人結(jié)直腸腺癌上皮細胞 人視網(wǎng)膜母細胞瘤,Y79細胞 人導(dǎo)管癌細胞;ZR-75-30地氯雷他定-d4質(zhì)量規(guī)格：美國進口Desloratadine-d4

HK-2(人腎小管上皮細胞) 5×106cells/瓶×23-羥基地氯雷他定β-D-葡萄糖醛酸苷質(zhì)量規(guī)格：美國進口3-Hydroxy Desloratadine β-D-Glucuronide

ACVR2B Others Human 人 ACVR2B / ActivinR-IIB 人細胞裂解液 (陽性對照) 奧司他韋酸-d3 質(zhì)量規(guī)格：美國進口Oseltamivir-d3 Acid

人真皮成纖維細胞-新生兒cDNAHDF-n cDNA6-氯咪唑并[1,2-b]噠嗪質(zhì)量規(guī)格：>98%6-Chloroimidazo[1,2-b]pyridazine