PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：豬輪狀病毒通用PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

3,3-Dimethoxy-5α-androstan-17-one  3591-19-3  中文名：3,3-二甲氧基-5α-雄烷-17-酮  分子式：C21H34O3  度：98.0%      小鼠甲狀旁腺激素(PTH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

3,3',4,4'-Benzophenone tetracarboxylic dianhydride  2421-28-5  中文名：3,3',4,4'-二苯甲酮四甲酸二酐  分子式：C17H6O7  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

3-(tert-Butoxycarbonyl)-2,2-dimethyl-4-phenyloxazolidine-5-carboxylic acid  143527-70-2  中文名：  分子式：C17H23NO5  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠甲基化酶(Methylase)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

3-(Hydroxymethyl)cyclopentanone  113681-11-1  中文名：  分子式：C6H10O2  度：%  關鍵詞：  植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠己糖激酶(HK)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

3-(Hydroxymethyl)cyclopentanol  1007125-14-5  中文名：  分子式：C6H12O2  度：%  關鍵詞：  植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠基質細胞衍生因子-1α   英文名稱：   somal-derived factor-1 a   規格：   48T/96T   英文縮寫：   SDF-1α
綿羊球蛋白A   英文名稱：   Immunoglobulin A   規格：   48T/96T   英文縮寫：   IgA  3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17β-ol  中文名：3-乙氧基雄-3,5-二烯-17β醇  分子式：C21H32O2  度：93.0%

綿羊促卵泡生成激素   英文名稱：   Follicle Stimulating Hormone   規格：   48T/96T   英文縮寫：   FSH  3-Ethyl-4-methyl-3-pyrrolin-2-one  766-36-9  中文名：  分子式：C7H11NO 

綿羊白介素2(IL-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Allyl phenoxyacetate  中文名：苯氧乙酸烯丙酯  分子式：C11H12O3 

綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶elisa試劑盒   綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶試劑盒   規格型號：96T/48T   綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶試劑盒、綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17-one  972-46-3  中文名：3-乙氧基-雄甾-3,5-二烯-17-酮  分子式：C21H30O2 

綿羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Allyl phenoxyacetate  中文名：苯氧乙酸烯丙酯  分子式：C11H12O3  度：98.0%
豬輪狀病毒通用PCR檢測試劑盒說明書TFPI Others Mouse 小鼠 TFPI / LACI / EPI 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,3-二溴丙酰胺(98%)質量規格：0.982,3-Dibromopropionamide

CL-0127JEG-3(人細胞)5×106cells/瓶×2滑石粉(800目)質量規格：800目Talc

IgG Others Rabbit 兔 IgG-Fc (185 Thr/Ala, Asn 284/Ser) 人細胞裂解液 (陽性對照) 滑石粉(藥用級,325目)質量規格：藥用級,325目Talc

小鼠小腸隱窩上皮細胞完全培養基 100mL硼砂pH標準物質(硼砂PH(25℃)：9.18)質量規格：硼砂PH(25℃)：9.18pH standard－Borax

Hepa 1-6小鼠細胞 Hepa mouse hepatoma cell line 1-6 DMEM+10%FBS(-)-莨菪堿,L-天仙子胺，L-天仙子堿質量規格：>99%(-)-Hyoscyamine
人絨毛間葉成纖維細胞總RNAHVMF NAGUANIDINExy7noCHLORIDE鹽酸胍技術級白色至微黃色顆粒結晶粉末RTsigma

EREG Others Human 人 Epiregulin / EREG 人細胞裂解液 (陽性對照) 氘代炳同-D6 cCqTONq-D6 666-2-4

Eca-109 人細胞葡聚糖凝膠 Sephade... Sephadex LH-20 Null 25G 分離試劑

CL-0393NCI-H209(人小細胞細胞)5×106cells/瓶×2HISTOCHOICETISSUEFIXATIVEWITHOUTALCOHOL組織固定劑組織學級微黃無混濁液體RTsigma

MA, 小鼠星形膠質細胞(糖原III)
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。