技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。

PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優(yōu)勢：
1. 特異性：豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
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Manidipine di  89226-75-5  中文名：鹽酸馬尼地平  分子式：C35H40Cl2N4O6    Human cholyglycine (CG) ELISA Kit 人甘膽酸(CG)ELISA試劑盒

Quetiapine  111974-69-7  中文名：喹硫平  分子式：C21H25N3O2S    rabbitLeptin,LEPELISAKit 兔子瘦素(LEP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
甲型H3N2HA1   英文名稱：   Influenza A H3N2 HA1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   H3N2 HA1  Przewaquinone A  中文名：紫丹參甲素  分子式：C19H18O4 

甲型H1N1   英文名稱：   Influenza A H1N1(Swine Flu 2009) HA   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   H1N1 HA  Prosapogenin A  19057-67-1  中文名：薯蕷次皂苷A  分子式：C39H62O12 

病毒抗體IgG   英文名稱：   Human Hepatitis A Virus IgG   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   HAV IgG  n-Tritriacontan-16,18-dione  24514-86-1  中文名：  分子式：C33H64O2  度：%  關(guān)鍵詞：  中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

甲型副傷寒沙門氏菌(SPA)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T                 Topiramate  97240-79-4  中文名：托吡酯  分子式：C12H21NO8S 

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豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒PCR檢測試劑盒價格TNFRSF17 Others Mouse 小鼠 TNFRSF17 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 亞胺培南-西司他丁鈉質(zhì)量規(guī)格：含量：Imipenem≥400μg/mg，Cilastatin(C16H26N2O5S) ≥400μg/mg,USP36Imipenem and Cilastatin

CL-0435SF126(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2長春西丁,長春西汀質(zhì)量規(guī)格：>99%,BP,BRVinpocetine

HA Others H12N1 甲型 H12N1 (A/mallard duck/Alberta/342/1983) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 苯妥英鈉質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRPhenytoin

大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL阿扎那韋（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Atazanavir

HL-7702人正常肝細(xì)胞 HL-7702 human normal liver cell 1640+10% FBS鹽酸托莫西汀質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRAtomoxetine HCl
人羊膜細(xì)胞;WISH4-十八烷氧基苯(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)4-Octadecyloxybenzaldehyde

LSAMP Others Human 人 LSAMP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4-丙氧基苯(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)4-Propoxybenzaldehyde

HCT 116 人細(xì)胞4'-丁基苯乙酮(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)4'-Butylacetophenone

OS-RC-2人細(xì)胞 Human renal cell carcinoma OS-RC-2 cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS4'-丁氧基苯乙酮(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)4'-Butoxyacetophenone

TNFSF13B Protein Human 重組人 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白4-酮基9-順式-甲酯視黃酸質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口4-Keto 9-cis Retinoic Acid Methyl Ester