PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術(shù)服務內(nèi)容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優(yōu)勢：
1. 特異性：豬圓環(huán)病毒2型PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

2-Flurbiprofen  中文名：氟比洛芬  分子式：C15H13FO2    血0濃度測試盒   可見分光光度法   50管/48樣

2-Fluoroadenosine  中文名：  分子式：C10H12FN5O4    血濃度測試盒   可見分光光度法   50管/48樣

2-Deoxy-2,2-difluoro-D-erythro-pentafuranous-1-ulose-3,5-dibenzoate  中文名：  分子式：C19H14F2O6    血清總鐵結(jié)合能力測試盒   可見分光光度法   50管/48樣           

2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-quinolyl-3-methanol  中文名：  分子式：C19H16FNO    血漿游離基因組DNA提取試劑盒   Plasma free genomic DNA Exaction Kit

2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)quinoline-3-carboxaldehyde  中文名：  分子式：C19H14FNO    M13噬菌體單鏈基因組DNA快速提取試劑盒   Rapid exaction kit for M13 phage single chain genomic DNA
環(huán)0酸腺苷   英文名稱：   cyclic adenosine monophosphate   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   cAMP  Withaphysalin E  118985-24-3  中文名：  分子式：C28H34O7 

環(huán)0酸鳥苷   英文名稱：   cyclic adenosine monophosphate   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   cGMP  vibo-Quercitol  488-76-6  中文名：  分子式：C6H12O5 

壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體受體1   英文名稱：   tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand receptor 1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   AIL R1  Perforatumone  827319-50-6  中文名：  分子式：C35H52O5 

壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體受體 3(AIL R3)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝     Arbidol   中文名：鹽酸阿比朵爾  分子式：C22H26BrClN2O3S 

壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體受體 1(AIL R1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  Arbidol   中文名：鹽酸阿比朵爾  分子式：C22H26BrClN2O3S  度：98.0%
豬圓環(huán)病毒2型PCR檢測試劑盒說明書TNFSF8 Others Human 人 CD30 Ligand / TNFSF8 人細胞裂解液 (陽性對照) 己二酸二異癸酯質(zhì)量規(guī)格：Diisodecyl Adipate

小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元MN-c壬二酸雙(2-乙基己基)酯(>75.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>75.0%(GC)Bis(2-ethylhexyl) Azelate

MSLN Others Human 人 MSLN / Mesothelin 人細胞裂解液 (陽性對照) 己二酸二異丙酯(>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)Diisopropyl Adipate

大鼠胰腺上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL己二酸二丁酯(>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)Dibutyl Adipate

BALL-1人B細胞急性細胞 BALL-1 B acute lymphoblastic leukemia cells 90%RPMI1640(內(nèi)含2mM L-glutamine)+10%胎牛血清吉非羅齊1-O-β-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格：美國進口Gemfibrozil 1-O-β-Glucuronide
PTPN2 Others Mouse 小鼠 PTPN2 / TC-PTP (aa 2-314) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) Anilinexy7nochloride阿尼林鹽0.25毫升CP

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-C4本加醋芐酯 Bqnzyl Bqnzoctq;Bqnzyl bqnzqnq ccrboxylctq;Bqnzyl phqnyl forMctq 10-21-4

T-47D細胞，管癌細胞 人細胞,EC871214細胞 大鼠細胞;UMR-106葡聚糖凝膠 Sephade... Sephadex G-50 Coarse 9048-71-9 100G 分離試劑

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B11,4-二乙磺酸倍半鈉鹽，英文名或英文縮寫：PIPES sesquiwo7ium salt，級別：AR，規(guī)格：100克

CDH2 Others Human 人 Cadherin-2 / CD325 / CDH2 / NCAD 人細胞裂解液 (陽性對照) MaltExtractAgar 500g原裝 BD 211220/Oxoid
反應五要素：
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。