PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：卵形PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

2-Benzothiazolyl diethyldithiocarbamate  95-30-7  中文名：二乙基二硫代氨基甲酸 2-苯并噻唑酯  分子式：C12H14N2S3    I 型膠原 N 末端肽 (X)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝

p-Anisoin  119-52-8  中文名：對茴香偶姻  分子式：C16H16O4     (NO)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝  

Benzoin  119-53-9  中文名：安息香  分子式：C14H12O2    神經生長因子   英文名稱：    nerve growth factor    規格：   48T/96T   英文縮寫：   NGF

3-Benzalphthalide  575-61-1  中文名：3-亞芐基苯酞  分子式：C15H10O2    神經生長因子受體   英文名稱：    nerve growth factor  receptor   規格：   48T/96T   英文縮寫：   NGFR

L-Aspartic acid  56-84-8  中文名：L-天門冬氨酸  分子式：C4H7NO4    中性粒細胞明膠酶相關性載脂蛋白   英文名稱：   Neuophil gelatinase-associated lipocalin   規格：   48T/96T   英文縮寫：   NGAL
封閉用正常山羊血清工作液  Ribavirin  36791-04-5  中文名：利巴韋林  分子式：C8H12N4O5  度：98.0%  關鍵詞： 

吩嗪甲酯   1g  Trenbolone acetate  10161-34-9  中文名：  分子式：C20H24O3  度：98.0%  關鍵詞： 

分泌型白細胞蛋白酶抑制物 (SLPI)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝  Anthraglycoside B  23313-21-5  中文名：大黃素-8-O-葡萄糖苷  分子式：C21H20O10 

肺表面活性物質相關蛋白A   英文名稱：   Pulmonary surfacta associated protein type A   規格：   48T/96T   英文縮寫：   SP-A  4-Allyloxy-2-hydroxybenzophenone  中文名：4-丙烯氧基-2-羥基二苯甲酮  分子式：C16H14O3  度：99.0%

肺表面活性物質相關蛋白 A(SP-A)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝  Atrazine  1912-24-9  中文名：阿特拉津  分子式：C8H14ClN5
卵形PCR檢測試劑盒供應WI-38AV13細胞，人SV-40轉化 大鼠胸主動脈平滑肌細胞，VSMC細胞 CL-0010786-O(人腎透明細胞癌細胞)5×106cells/瓶×2硫普羅寧（標準品）質量規格：含量測定Tiopronin

SP2/0(小鼠細胞) 5×106cells/瓶×2多索茶堿質量規格：>99%,BRDoxofylline

HDBEC-c 人類皮膚血內皮細胞(HDBEC)來自少年者 500,000cells 肝動脈內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)多索茶堿（標準品）質量規格：含量測定Doxofylline

心肌成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)PRT062607 (P505-15, BIIB057) HCl 質量規格：>98%,Syk PRT062607 (P505-15, BIIB057) HCl

CD86 Others Rat 大鼠 CD86 / B7-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 硫代煙酰胺腺嘌呤二核苷酸1酸鈉鹽質量規格：美國進口Thionicotinamide adenine dinucleotidephosphate  salt
TNFRSF1B Others Mouse 小鼠 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人細胞裂解液 (陽性對照) N-二乙基亞硝，英文名或英文縮寫：N-nitnosodietxylamine，級別：BR，98%，規格：5克

人肝臟間充質干細胞HMSC-hp2-羰基鈉鹽  2-oxobutyrate 2013-26-5 1G 通用試劑

TLK1 Others Human 人 TLK1 / PKU-beta 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) L(+)樹膠全糖(啊拉伯糖) L-cRcBINOSq 238-37-0

VERO細胞衍生株;SVP偶氮脒類引發劑V50shēng huà shì jì容量：2～8℃1克

CGM1細胞，EB病毒轉化的B細胞 人結直腸腺癌細胞,LS174T細胞 CM-R029大鼠腸平滑肌細胞完全培養基100mL1,8-桉樹腦Cineole
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。