PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：副病毒5型PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

2,2-Bis(hydroxymethyl)butyric acid  10097-02-6  中文名：2,2-二羥甲基丁酸  分子式：C6H12O4  度：98.0%      小鼠神經生長因子(mouse NGF)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝  

2,2-Bis(4-chloroformyloxyphenyl)propane  2024-88-6  中文名：2,2-雙(4-氯甲酰氧苯基)丙烷  分子式：C17H14Cl2O4  度：98.0%      小鼠核因子κB抑制蛋白α（IKB-α）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

2,2-Bis(3-amino-4-hydroxyphenyl)hexafluoropropane  83558-87-6  中文名：2,2-雙(3-氨基-4-羥苯基)六氟丙烷  分子式：C15H12F6N2O2  度：98.0%      小鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)ELISA試劑盒   48T/96T   試劑盒   組裝/原裝

2,2'-Bicinchoninic acid  1245-13-2  中文名：2,2'-二辛可寧酸  分子式：C20H12N2O4  度：98.0%      小鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

2,2'-Anhydro-5-methyluridine  22423-26-3  中文名：2,2'-O-脫水-5-甲基尿嘧啶核苷  分子式：C10H12N2O5  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
rabbitfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit兔子促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒規格：96T/48T  2-Amino-4-chlorobenzothiazole  中文名：2-氨基-4-氯苯并噻唑  分子式：C7H5ClN2S 

rabbitfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit 兔子促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  20-Hydroxyecdysone  中文名：20-羥基蛻皮甾酮  分子式：C27H44O7  度：98.0%

rabbitFibrinogenDegradationProduct,FDPELISAKit兔子血纖蛋白原降解產物(FDP)ELISA試劑盒規格：96T/48T  2-Amino-3-chloro-1,4-naphthoquinone  2797-51-5  中文名：2-氨基-3-氯-1,4-萘醌  分子式：C10H6ClNO2 

rabbitFibrinogenDegradationProduct,FDPELISAKit 兔子血纖蛋白原降解產物(FDP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  2,4-Dihydroxy-3-nitropyridine  中文名：  分子式：C5H4N2O4  度：98.0%

RabbitFibrinogen,FbgELISAKit兔血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒規格：96T/48T  2-Amino-3-Formylchromone  中文名：2-氨基-3-甲酰基色原酮  分子式：C10H7NO3
副病毒5型PCR檢測試劑盒供應非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4B 人細胞，SK-HEP-1細胞 95-D(高轉移細胞)醋酸戈舍瑞林 質量規格：BR,>98%Goserelin Acetate

人細胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS]醋酸亮丙瑞林 質量規格：BR,>98%Leuprolide Acetate

TDGF1 Others Human 人 TDGF1 / CRGF 人細胞裂解液 (陽性對照) 醋酸地塞米質量規格：>98%,BP,BR,可用于細胞培養Dexamethasone Acetate

CM-H030人外周血白細胞完全培養基100mL醋酸地塞米（標準品）質量規格：HPLC>98%,標準品Dexamethasone Acetate

MAPK12 Others Human 人 ERK3 / MAPK12 / P38-gamma 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 甲氧芐啶質量規格：>99.5%,超,BP2010,BR,可用于細胞培養Trimethoprim
H22 小鼠細胞2-氯蒽(>98.0%(GC))質量規格：>98.0%(GC)2-Chloroanthracene

DSC2 Others Human 人 DSC2 / Desmocollin-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 9,10-二氯蒽(>96.0%(GC))質量規格：>96.0%(GC)9,10-Dichloroanthracene

人正常肝細胞;L-021,5-二溴蒽(>97.0%(GC))質量規格：>97.0%(GC)1,5-Dibromoanthracene

HA Others H5N2 甲型 H5N2 (A/osich/South Africa/AI1091/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,8-二蒽(>98.0%(GC))質量規格：>98.0%(GC)1,8-Diiodoanthracene

NCI-H292 人細胞(結轉移)9-酮基利培酮質量規格：美國進口9-Keto Risperidone
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。