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    上海帛科生物技術(shù)有限公司
       
       
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    恙蟲(chóng)病東方體PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
    • 品牌:帛科
    • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
    • 貨號(hào):BKP4114
    • 價(jià)格: ¥3800/盒
    • 發(fā)布日期: 2020-11-13
    • 更新日期: 2025-09-10
    產(chǎn)品詳請(qǐng)
    產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
    品牌 帛科
    貨號(hào) BKP4114
    用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
    包裝規(guī)格 50次
    純度 %
    CAS編號(hào)
    是否進(jìn)口

    本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

    技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:

    實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

    產(chǎn)品名稱

    英文名稱

    貨號(hào)

    恙蟲(chóng)病東方體PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

    Orientia tsutsugamushiPCR

    BKP4114

    PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

    方法
    1
    :在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
    10×PCR buffer                   
    5 μl     dNTP mix
    2mM             
    4 μl     
    引物110pM                 
    2 μl     
    引物210pM                 
    2 μl     Taq
    2U/μl               
    1 μl     DNA
    模板(50ng-1μg/μl  
    1 μl     
    ddH2O 50 μl  
    PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
    2
    :調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min。
    3
    :伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測(cè)或-20長(zhǎng)期保存。
    4
    PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

    反應(yīng)五要素:
    參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
    引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
    引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
    引物擴(kuò)增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
    引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
    避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
    引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
    引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
    引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
    引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
    非洲綠猴腎細(xì)胞;VEROBenzethoniumchloride海胺16221公斤試劑級(jí)

    LRG1 Others Human LRG1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1,2-本并(+4) 1,2-BqNZcNTHRcCqNq 26-22-3

    眼晶狀體上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml) MolybdqnuM 7439-98-7

    Jurkat E6-1細(xì)胞,人T細(xì)胞瘤 人癌細(xì)胞,4T1細(xì)胞 上皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加物-2EpiCGS-26-甲基25

    水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S2(3-7萬(wàn))(多聚-L-賴酸)
    AAV-293
    細(xì)胞,人人胚腎細(xì)胞 大鼠心肌細(xì)胞,H9c2(2-1)細(xì)胞 CL-0332Dami(人巨核細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2鹽酸卡替洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)2(1H)-QUINOLINONE質(zhì)量規(guī)格:鑒別

    BC-019(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2二甲磺酸阿米三嗪(標(biāo)準(zhǔn)品)Almitrine Bismesylate質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定

    HMEpC-c 人類上皮細(xì)胞(HMEpC) 500,000cells 人神經(jīng)細(xì)胞HN蘿巴新(標(biāo)準(zhǔn)品)Raubasine質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定

    原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml卡莫氟(標(biāo)準(zhǔn)品)Carmofur質(zhì)量規(guī)格:供HPLC法含量測(cè)定用

    CDCP1 Others Mouse 小鼠 CDCP1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 尼可占替諾(煙酸占替諾)標(biāo)準(zhǔn)品Xanthinol nicotinate質(zhì)量規(guī)格:供HPLC法含量測(cè)定用
    恙蟲(chóng)病東方體PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)LS180細(xì)胞,人腺癌細(xì)胞 人眼脈絡(luò)色素瘤細(xì)胞,MuM-2B細(xì)胞 人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤;U-87 MG [U87MG;U87 MG]阿普斯特;CC10004Apremilast;CC-10004質(zhì)量規(guī)格:>98%,PDE4TNF-α抑制劑

    HGC-27(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2氨丁三醇(標(biāo)準(zhǔn)品)TRISTEARIN質(zhì)量規(guī)格:鑒別

    CD244 Others Human 2B4 / SLAMF / CD244 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鹽酸替扎尼定(標(biāo)準(zhǔn)品)Tizanidine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定

    人肺微內(nèi)皮細(xì)胞HPMECTubastatin A HCLTubastatin A Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:>98%,HDAC6抑制劑

    CASK Others Human CASK Kinase 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鹽酸莫索尼定(標(biāo)準(zhǔn)品)Moxonidine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
    尿道上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)2-脫氧胞苷-5-三嶙酸三鈉鹽25

    CD160 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD160 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 6--1-羌基本并三氮坐 (Cl-HOBt) (2-8) 6-Chloro-1-xy7noxibqnzotriczol 6198-19-6

    小鼠單核巨噬細(xì)胞;J774A.1GUANIDINExy7noCHLORIDE鹽酸胍蛋白組學(xué)級(jí)250G1950-1-1RT

    973細(xì)胞,人細(xì)胞 小鼠成骨細(xì)胞系,MC3T3-E1細(xì)胞 CL-0138Lec1(倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2瓊脂糖凝膠6Bshēng huà shì jì容量:20KU

    THP-1(人髓系單核細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2POPSO 25g/100g原裝 Amresco J597

    特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
    1. 特異性:恙蟲(chóng)病東方體PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%
     2.   
    重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
    3.   
    靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
    4.   
    實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
    5.   
    優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。


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