PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：綿羊莫拉菌PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

HA Others H2N2 甲型 H2N2 (A/Guiyang/1/1957) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) ZincAcetateDihydrate醋酸鋅二水美國藥典級白色精細粉末RTsigma

人EB病毒轉化的B細胞;CGM1暈苯 Coronene,97% 191-07-1 100MG 通用試劑

正常大鼠腎細胞;NRK 腺癌細胞，COLO-320細胞 ST細胞，豬細胞系(ST)務二臘酐 Glutcric cnhydridq 108-22-4

Ca Ski, 人細胞 HumanDigitonin洋地黃皂苷5克BR，95%

HAVCR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 HAVCR1 / TIM1 / TIMD1 人細胞裂解液 (陽性對照) 佛手油NA
FAM19A2 Protein Human 重組人 FAM19A2 蛋白 (Fc 標簽)頭孢匹林鈉 Cefapirin 質量規格：Content 96.0-102.0%,BR

OVCAR-3(人細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H1N1 (A/California/07/2009) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 5,7-二氯-8-羥基喹哪啶;氯喹那多Chlorquinaldol質量規格：>98%,BR

小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-L1癸氧喹酯;乙癸氧喹酯Decoquinate質量規格：>99(T)

PRC1 Others Human 人 PRC1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (S)-2-氨基-5-甲氧基四氫萘鹽酸鹽 (S)-2-Amino-5-methoxytetralin Hydrochloride質量規格：>98%

CM-R110大鼠神經小膠質細胞完全培養基100mL巴馬司他;BB94Batimastat(BB-94)質量規格：>98%,MMP(基質金屬蛋白酶)抑制劑
綿羊莫拉菌PCR檢測試劑盒直銷FIGF Protein Human 重組人 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (His 標簽)DL-半胱氨酸DL-Cysteine 質量規格：>97%,易氧化

小鼠神經質細胞(MN-sn)(1×106) T24, 人細胞 HumanL-谷氨酰胺叔丁酯鹽酸鹽L-Glutamine t-butyl ester hydrochloride質量規格：0.98

犬腎細胞;MDCK(NBL-2)L-谷氨酸-5-叔丁酯-1-甲酯鹽酸鹽L-Glutamic acid 5-tert-butyl 1-methyl ester hydrochloride 質量規格：>95%,BR

GAD2 Others Mouse 小鼠 GAD65 / GAD2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) N-芐基甘氨酸鹽酸鹽Bzl-Gly-OH·HCl質量規格：0.98

皮膚肥大細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)甘氨酸芐酯鹽酸鹽Glycine benzyl ester hydrochloride質量規格：0.98
人胚腎細胞(亞系克隆);FIP293D-谷酰胺10克RT

ADAM9 Others Mouse 小鼠 ADAM9 人細胞裂解液 (陽性對照) 二十二醇 Behenyl Alcohol,98% 661-19-8 25G 通用試劑

HCC827 人非小細胞細胞拂化 litxium fluoridq 7789/4/4

2V6.11人胚腎細胞 Human embryonic kidney cell line 2V6.11 MEM培養基(GIBCO)+10%FBS輔酶A10克RT

TNF Protein Ferret 重組雪貂 TNF-alpha / TNFA 蛋白PH緩沖液　PH5.0(20℃)NA
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。