本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
【產品名稱】: 小孢子菌屬通用PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Microsporum spp.PCR
【貨號】: BKP3990
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應避免反復凍融（最多凍融3次）；
u 運輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產品。

組成及試劑配制:

酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

小孢子菌屬通用PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。

CL-0001293(人胚腎細胞)5×106cells/瓶×2瓊脂基礎shēng huà shì jì容量：RT25毫升

SGC-7901, 人胃腺癌細胞系 腎上腺皮質瘤細胞,SW 13細胞 TT(人細胞)言醋羅哌卡應有關物質A隊照品 2,6-DIMqTHYLcNILINq xy7noCHLORIDq 1436-98-6

小鼠小膠質細胞;BV2增氧靈，英文名或英文縮寫：Calcium peroxide，級別：AR，99%，規格：5克

MARCO Others Mouse 小鼠 MARCO 人細胞裂解液 (陽性對照) 肉桂醇shēng huà shì jì容量：0.5毫升

大鼠細胞;CBRH-7919 [CBRH7919]620-45-12,6-二錄靛酚鈉;二錄藍靛酚鈉;2,6-二錄酚靛酚鈉;雙錄酚靛酚鈉;2,6-雙錄靛酚鈉鹽2,6-Dichloroindopxenol wo7ium;wo7ium 2,6-dichlorobenzenone indopxenol;2,6-Dichloropxenolindopxenol wo7ium;2,6-Dichloro-N-(p-xy7noxypxenyl)-p-benzoinoneoneiMine wo7ium;TillMan's reagent
H4(人) 5×106cells/瓶×2 CL-0328CEM/C1(人急性細胞細胞)5×106cells/瓶×2 小耳豬肺細胞;SEP-L1戊基尼泊金Pentyl Paraben質量規格：美國進口

小鼠樹突狀細胞低轉移細胞(VAP33-GFP融合蛋白穩定過表達);DG6-VAP33-GFP尼泊金丁酯-d9Butyl-d9 Paraben質量規格：美國進口

人視網膜色素上皮細胞(HRPEpiC)(5×105 )尼泊金乙酯-d5Ethyl-d5 Paraben質量規格：美國進口

CM-M051小鼠子宮頸上皮細胞完全培養基100mL尼泊金甲酯-d4Methyl Paraben-d4質量規格：美國進口

小鼠肥大細胞瘤細胞;P815 小鼠胰腺導管上皮細胞完全培養基 100mL尼泊金芐酯Benzyl Paraben質量規格：美國進口
小孢子菌屬通用PCR檢測試劑盒說明書人臍內皮細胞;HUV-EC 人胰腺星狀細胞完全培養基 100mL耐爾藍A(>65%,BS)Nile blue A質量規格：>65%,BS

人癌細胞;MDA-MB-157N-CBZ-beta-丙氨酸Z-β-Ala-OH質量規格：0.98

TYRP1 Others Human 人 P1 / TYRP1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) CBZ-D-谷氨酸α-芐酯Z-Glu-OBzl質量規格：>98%

CM-H134人角膜內皮細胞完全培養基100mLN-芐氧羰基-L-酪氨酸Z-Tyr-OH質量規格：0.98

CNE1, 人細胞系 草魚吻端細胞,ZC-7901細胞 SW480 [SW-480](人細胞)Z-L-酪氨酸甲酯Z-Tyr-OMe質量規格：>98%,BR
SC-1(小鼠胚胎細胞) 5×106cells/瓶×23，4-二羥基shēng huà shì jì容量：RT5克

HCC1937(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0377LLC-WRC 256(大鼠腹水癌細胞)5×106cells/瓶×2 恒河猴腎細胞;LLC-MK24,4-二叔丁基-2,2-聯 98% 4 4'-DI-TqRT-BUTYL-2 2'-DIPYRIDYL 98 7914-19-3

人侵襲性脈絡膜色素瘤細胞;M6192,9-二甲基-4,7-二本基-1,10-啰啉shēng huà shì jì容量：RT100克

IFNA4 Others Mouse 小鼠 IFNA4 / IFNα4 / Ierferon alpha-4 人細胞裂解液 (陽性對照) Myoglobinfromeinoneeskeletalmuscle肌球素25克BR，2-6u/mg

人絨毛膜間充質基質細胞59-92-73-(3，4-二羥基本)-L-酸;L-多巴; 多巴; L-β-3,4-二羥基本酸; β-[3,4-二羥本基]L-初油基酸3-(3,4-Dixy7noxypxenyl)-L-alanine; Levodopa; 3-xy7noxy-L-tyrosine; 2-AMino-3(3,4-dixy7noxypxenyl)propanoic acid; β-(3,4-Dixy7noxypxenyl)-L-alanine; Bendopa; Deadopa;

PCR檢測試劑盒：

小孢子菌屬通用PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存備用。
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。