同綿羊肺腺瘤病病毒PCR檢測試劑盒說明書【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應避免反復凍融（最多凍融3次）；
u 運輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產品。

【產品名稱】: 同綿羊肺腺瘤病病毒PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Ovine pulmonary adenocarcinoma virus（OPAV，JSRV）RTPCR
【貨號】: BKP4134
組成及試劑配制:

酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

同綿羊肺腺瘤病病毒PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。

2-(4-Chloro-3-hydroxy-1-butynyl)-5-(1,3-pentadiynyl)thiophene  26905-70-4  中文名：  分子式：C13H9ClOS  度：98.0%  關鍵詞：  植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠漢坦病毒（HV）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

2-(3-Methoxypropyl)-4-oxo-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide  154127-41-0  中文名：  分子式：C10H14N2O6S3  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

2-(2'-Hydroxytetracosanoylamino)-octadecane-1,3,4-triol tetraacetate  340702-68-3  中文名：  分子式：C50H93NO9  度：96.0%  關鍵詞：  神經酰胺; 腦苷脂; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

2-(2'-Hydroxytetracosanoylamino)-octadecane-1,3,4-triol  154801-30-6  中文名：  分子式：C42H85NO5  度：96.0%  關鍵詞：  中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠過敏/補體片斷4a(C4a)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

2-(2-Aminothiazole-4-yl)-2-methoxyiminoacetic acid  65872-41-5  中文名：氨噻肟酸  分子式：C6H7N3O3S  度：98.0%      小鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
P 物質 (Substance P)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝  Anthraflavic acid  中文名：二羥蒽醌  分子式：C14H8O4  度：98.0%

OX-40 ELISA Kit   作用：   ELISA   規格：   96T   奧地利 Bender  3-Methoxyfuran  中文名：  分子式：C5H6O2  度：99.0%

N-三(羥甲基)甲基甘酸   500g  3-Amino-5-phenylpyrazole  中文名：3-氨基-5-苯基吡唑  分子式：C9H9N3  度：98.0%

NeomycinSulfate   25g                 Zidovudine  30516-87-1  中文名：齊多夫定  分子式：C10H13N5O4 

N-Dodecyl-β-Maltoside  Zidovudine  中文名：齊多夫定  分子式：C10H13N5O4
猴腎細胞;Vero IgCD4煙曲霉素質量規格：>98%,進分Fumagillin from Aspergillus fumigatus

IL12B Others Human 人 IL12B / P40 人細胞裂解液 (陽性對照) 寡霉素B質量規格：>97%,進分Oligomycin B from Streptomyces

豬細胞;ST棒曲霉素質量規格：>98%,進口Patulin from Penicillium expansum

VEGFC Others Rat 大鼠 VEGFC / VEGF-C (aa 108-223) 人細胞裂解液 (陽性對照) 3-溴二苯甲酮 質量規格：>97%,原裝進口3-Bromobenzophenone

人氣管平滑肌細胞完全培養基 100mL1丙基-β-D-吡喃半乳糖苷質量規格：>98%,BRALLYL-BETA-D-GALACTOPYRANOSIDE
同綿羊肺腺瘤病病毒PCR檢測試劑盒說明書人胚;MRC-53,6-二甲基-1,4-二氧雜環-2,5-二酮，英文名或英文縮寫：DL-Lactide，級別：CP，99%，規格：250毫克

PROS1 Others Human 人 PROS1 / Protein S 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-錄-5-肖基本全 2-Chloro-5-nitnobqnzcldqhydq 6361/1/3

CL-0335EB (NBL-4) (牛胚氣管細胞)5×106cells/瓶×23，4-二錄，英文名或英文縮寫：3,4-Dichlorobenzdehyde，級別：特，99%，規格：100克

45.6.TG1.7細胞，細胞 人T細胞細胞,HuT 78細胞 EB病毒轉化的人B細胞;KMY0901吲哚試劑(Kovacs)shēng huà shì jì容量：RT1米

293(人胚腎細胞) 5×106cells/瓶×2540-84-12,2,4-基;2,2,4-Trimetxylpentane

PCR檢測試劑盒

 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存備用。
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。