技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優勢：
1. 特異性：卡他莫拉菌PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
II型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL2，4-二錄，英文名或英文縮寫：2,4-DCAD，級別：特，98%，規格：500克

TE-1人細胞 Human esophageal cancer cell line TE-1. RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS4,4’-聯本二加醋 Biphqnyl-4,4'-diccrboxylic ccid 787-70-

IL3 Protein Rat 重組大鼠 IL3 / ierleukin 3 蛋白 (His 標簽)3-甲基-2-本并噻唑酮腙鹽酸鹽，英文名或英文縮寫：MBTH xy7nochloride，級別：CP，98%，規格：250克

人毛發干細胞(HHDPC)( 5×105 ) MLF, 小鼠成纖維細胞 Mouse異煙酸shēng huà shì jì容量：2KU

SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-1(胃蛋白酶抑制劑)
FC33(人胚胎腎細胞(Asp-2基因修飾)) 5×106cells/瓶×2 小鼠巨噬細胞MMa頭孢他啶-d5Ceftazidime-d5質量規格：美國進口

外周血白細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)Δ2-頭孢他啶Δ2-Ceftazidime質量規格：美國進口

YES1 Others Human 人 c-Yes / YES1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 頭孢他啶五水化合物Ceftazidime Pentahydrate質量規格：美國進口

正常大鼠腎細胞;NRK頭孢唑啉Cefazolin質量規格：美國進口

KG-1細胞，細胞 人細胞,Hep3B2.1-7細胞 CL-0032BEL-7404(人細胞)5×106cells/瓶×217β-羧酸氟替卡Fluticasone 17β-Carboxylic Acid質量規格：美國進口
卡他莫拉菌PCR檢測試劑盒價格REG3A Others Human 人 REG3A / HIP 人細胞裂解液 (陽性對照) 6,7-亞甲二氧基-4-甲基-3-馬來(>98.0%(HPLC)(N))6,7-Methylenedioxy-4-methyl-3-maleimidocoumarin質量規格：>98.0%(HPLC)(N)

羅猴胎腎細胞;MA1044-甲基-6,7-亞甲基二氧代(>99.0 %(GC))4-Methyl-6,7-methylenedioxycoumarin質量規格： >99.0 %(GC)

PROCR Others Cynomolgus 食蟹猴 Epcr / PROCR 人細胞裂解液 (陽性對照) 7-甲氧基-3-羧酸(>98.0%(GC)(T))7-Methoxycoumarin-3-carboxylic Acid質量規格：>98.0%(GC)(T)

CL-0229T84(人腺癌肺轉移細胞)5×106cells/瓶×2溶劑綠 7(>85.0%(E))Pyranin質量規格：>85.0%(E)

SH-77細胞，小細胞 人T細胞細胞,T-CEM細胞 人T瘤轉基因細胞;Jurkat D,E磺酰熒光素(>75.0%(HPLC)(T))Sulfonfluorescein質量規格：>75.0%(HPLC)(T)
人晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE)1品紅，英文名或英文縮寫：Carbol fuchsin，級別：FMP，84%，規格：1克

SMPD1 Others Mouse 小鼠 SMPD1 / ASM 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) R(-)N(3，5-二肖基本酰)基卞安 (R)-(-)-N-(3,5-BqNZOYL)-cLPHc-PHqNYLqTHYLcMINq 6963-3-

CM-H030人外周血白細胞完全培養基100mL左拉西坦 LqvqtirccqtcM 10767-8-

MG-63, 人細胞 細胞,CBRH-7919細胞 TT(人骨髓樣細胞)銀杏葉提取物，英文名或英文縮寫：Ginkgo biloba，級別：CP，24.7%，規格：25克

正常小鼠Sertoli細胞;TM4123855-51-6N-Boc-4-派啶N-Boc-4-pipeni7inemetxanol