技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優勢：
1. 特異性：犬小孢子菌PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
KYSE450 橘霉素，英文名或英文縮寫：Citrinin，級別：組織培養級，10KU/ml，規格：500毫克

RL95-2人細胞 Human endomeial carcinoma cells RL95-2 D-MEM/F-12培養基+10%FBS十六烷基二基基溴化銨 (EHDAB) CqTYLDIMqTHYLqTHYLcMMONIUM BROMIDq 2014/3/8

HGF Protein Mouse 重組小鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 (His 標簽)SULFATEHEPTAHYDRATE,七水ACS級白色粉末RTsigma

小小神經膠質細胞(MM)(5×105) RBE, 人肝細胞 Human葡糖酸鉀鹽，英文名或英文縮寫：potewwium gluconate，級別：土豆來源，規格：1克

大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化);PC-12(低分化)4-Chloro-1-Naphthol 5g/10g/25g/50g原裝 Amresco 0398
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 酞菁銅(II)(β-型)(>90.0%(T))Copper(II) Phthalocyanine (β-form)質量規格：>90.0%(T)

小鼠子細胞;U14三(1,3-二苯基-1,3-丙二酮基)(1,10-鄰二氮雜菲)銪(Ⅲ)(>95.0%(T))Tris(1,3-diphenyl-1,3-propanedionato)(1,10-phenanthroline)europium(III)質量規格：>95.0%(T)

METAP2 Others Mouse 小鼠 METAP2 / MAP2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 3-(2-苯并噻唑基)-7-(二乙氨基)(>98.0%(HPLC)(T))3-(2-Benzothiazolyl)-7-(diethylamino)coumarin質量規格：>98.0%(HPLC)(T)

CM-M001小鼠肺微內皮細胞完全培養基100mL 3-(2-苯并咪唑基)-7-(二乙氨基)(>98.0%(T))3-(2-Benzimidazolyl)-7-(diethylamino)coumarin質量規格：>98.0%(T)

Hela, 人細胞系 小鼠成纖維細胞,3T3TK細胞 SPA-A1()4,4'-雙(5-甲基-2-苯并惡唑基)芪(升華提)(>96.0%(HPLC))4,4'-Bis(5-methyl-2-benzoxazolyl)stilbene (purified by sublimation)質量規格：>96.0%(HPLC)
犬小孢子菌PCR檢測試劑盒供應JEG-3(人細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 IL-21R / Ierleukin-21 Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) 輪環藤寧四乙酸/1,4,7,10-四氮雜環十二烷-1,4,7,10-四乙酸Tetraxetan/DOTA/1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid質量規格：>95%

人成細胞;Saos-2p, p’-DDE(標準品)p, p’-DDE質量規格：分析標準品

PPP3CA Others Human 人 PPP3CA / 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) p, p’-DDE標準溶液(100μg/ml,u=3%)p, p’-DDE solution質量規格：100μg/ml,u=3%

CL-0429Romas(人瘤細胞)5×106cells/瓶×2敵草腈(標準品)Dichlobenil質量規格：分析標準品

人絨毛膜內皮細胞 人胚胎皮膚成纖維細胞，CCC-ESF-1細胞 Sol8(小鼠骨骼肌肌肉母細胞)乙二醇苯(標準品)Ethylene glycol monophenyl ether質量規格：分析標準品,≥99.5%(GC)
CCL18 Protein Human 重組人 CCL18 / PARC / MIP4 蛋白 (His 標簽)偏釩酸鈉shēng huà shì jì容量：0.25毫升

MCF-7(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 EpCAM / OP-1 / TACSTD1 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,5-二溴 2,5-Dibromopyridinq 64-8-

貓腎細胞;CRFK正shēng huà shì jì容量：100克

人顱骨造骨細胞 (HCO) ( 5×105 )馬丁肉湯shēng huà shì jì容量：RT支

CL-0099HEC-1-A(人子宮內膜腺癌細胞)5×106cells/瓶×278-79-5, 99%Isoprene